Tetratiónový vývar Čo je, nadácia, príprava, používa

On Tetrovačný vývar O TT BORT je selektívne kvapalné kultivačné médium na obohatenie a regeneráciu kmeňov rodu Salmonella. Vytvoril ho Müeller a neskôr upravil Kauffmann, takže sú tí, ktorí ho nazývajú Müeller-Kauffmann Both.

Pôvodné médium obsahovalo proteín PEPTONAS, uhličitan vápenatý a tiosulfát sodný. Kauffmann pridal žlčové soli a vytvoril ďalšiu modalitu s jasne zeleňou. Tieto látky inhibujú rast koliformov a zanecháva voľné médium na vývoj patogénnych baktérií v tomto prípade Salmonella.

Agregát roztoku jodúrového jodúru do tétratato bujónu. Zdroj: Manuel Almagro Rivas [CC BY-SA 4.0 (https: // creativeCommons.Org/licencie/By-SA/4.0)]

Modifikácia bola veľmi úspešná, pretože citlivosť média sa výrazne zvýšila. Preto je v súčasnosti užitočný pri hľadaní salmonelly v akejkoľvek vzorke, ale najmä pre tuhé alebo tekuté výkaly a jedlo.

Jeho príprava pozostáva z dvoch fáz; Komerčné médium je základom prípravy tetričného vývaru a neskôr, aby sa tetrationato mohol vytvoriť jódový roztok, ktorý médium dokončí.

Americká asociácia verejného zdravia (APHA) odporúča použitie tetratationátového vývaru doplneného jasne zeleňou na obohatenie vzoriek pri hľadaní salmonel, pretože je selektívnejšia ako tetratiónový vývar a bujón Selenito.

Všeobecne platí, že tetrtračný vývar je ideálny, keď je prítomnosť baktérií rodu Salmonella podozrivá v malých množstvách alebo ktoré sú zle zaobchádzané vystavením inhibičným látkam alebo priemyselným procesom, ktoré minimalizujú ich životaschopnosť.

Základ

Prítomné peptóny zodpovedajú digreatickému kazeínu a digreted digreal peptický tkanivový peptik. Poskytujú zdroj uhlíka, dusíka a živín všeobecne pre bakteriálny rast.

Môže vám slúžiť: Mastozoológia: pôvod, aké štúdie, príklad výskumu

Pokiaľ ide o to, tiosulfát sodný reaguje s roztokom jodidu za vzniku tetrationato. To inhibuje rast koliformov a uprednostňuje vývoj baktérií, ktoré obsahujú enzým Tetrationato reduktázu, medzi nimi je rodová samonella, ale aj proteus.

Žlčové soli tiež pôsobia ako inhibičná látka najviac pozitívnych gramových baktérií a niektorých gramových negatívnych (koliformné).

Uhličitan vápenatý absorbuje toxické látky generované rozkladom tetrationato, ktorý tvorí kyselinu sírovú. V tomto zmysle uhličitan vápenatý neutralizuje kyslosť udržiavanie pH stabilného média.

V prípade modality s brilantnou zeleňou táto látka zvyšuje selektívnu silu tetratacionátu bujón inhibíciou iných mikroorganizmov iných ako rodová samonella.

Príprava

-Tetrovačný vývar

Roztok jódu jodurada

Vážiť:

• 6 g z jódu.
• 5 g jodid draselného.

Jodid draselný sa rozpustí v približne 5 ml sterilnej destilovanej vode, potom sa jód pridá, zatiaľ čo zmes sa zahrieva. Potom, čo je úplne rozpustený, je v rovine sterilnou destilovanou vodou, až kým nedosiahne konečný objem 20 ml.

Polovičná základňa pre tetrationato vývar

Vážiť 46 gramov dehydratovaného média a suspendujte v 1 litri sterilnej destilovanej vody. Zmiešajte a zahrievajte na svoje celkové rozpustenie, môže viesť iba na niekoľko minút. V autokláve sa nesterilizujte. Základňa média sa nechá ochladiť až 45 ° C približne a v tom čase sa pridá 20 ml roztoku jodure.

Po pridaní jodurovaného roztoku do média sa musí okamžite použiť. Ak nechcete používať celú zmes, postupujte takto:

Môže vám slúžiť: Intra -špecifická konkurencia: Charakteristiky, typy a príklady

10 ml základného média je distribuovaná v skúmavkách a iba tým, ktorí budú naočkované vzorkami, sa pridá 0,2 ml jodurovaného roztoku.

Tí, ktorí sa nebudú používať.

Farba média pred pridaním roztoku jodidu jodidu je mliečna biela s bielym zrazeninou a po agregáte je hnedá s hustou zrazeninou. Pozorovaná zrazenina je normálna a zodpovedá uhličitanu vápenatý, ktorý sa nerozpustil. Konečné pH média je 8,4 ± 0,2.

-Variant vývaru Tetrativátu s jasne zeleňou

Na prípravu tetričného vývaru s jasne zelenou sa vykonávajú všetky vyššie opísané kroky, ale navyše sa pridajú do zmesi pripraveného jasne zeleného roztoku 0,1%.

Žiarivý zelený

Toto riešenie je pripravené nasledovne:

Vážiť 0,1 g jasne zelenej a suspendujte v 100 ml destilovanej vody. Zohriať sa do varu, aby ste dosiahli jeho úplné rozpustenie. Ušetrite v jantárovej fľaši.

Využitie

Pre vzorky výkalov (coproulture) je protokol nasledujúci:

Naočkujte 1 g z tuhých výkalov alebo 1 ml kvapalných výkalov v trubici s 10 ml tetratacionátu. Silne sa roztiahnite a inkubujte aerobiózu pri 43 ° C počas 6-24 hodín.

Následne si vezmite alikvot 10 až 20 ul vývaru a stúpa v selektívnom médiu pre salmonellu, ako je SS Agar, XLD agar, jasne zelený agar, Enterický agar Hektoen.

Paralelne sa musia naočkovať selektívne prostriedky pre Salmonella bez obohatenia. Pre vzorky rektálneho tampónu si stiahnite materiál zozbieraný v trubi.

Môže vám slúžiť: lipogenéza: charakteristiky, funkcie a reakcie

Pre vzorky potravín vážte 10 GR tuhých potravín alebo 10 ml tekutého potravy a inokulujte fľašu so 100 ml tetratiónového vývaru pripravené na použitie. Postupujte rovnakým spôsobom, ako je opísané vyššie, ale inkubujte 37 ° C.

Ako je vidieť, vzťah medzi vzorkou a vývarom bude vždy 1:10.

Qa

Na testovanie kultivačného média môžete použiť kmene známe kontroly. Najpoužívanejšie sú kmene certifikované ATCC.

Kmene, ktoré sa majú použiť, sú Salmonella typhimurium ATCC 14028, Húževnatosť Salmonella DSM 4224, Salmonella Enteritidis ATCC 13076, Escherichia coli ATCC 25922, Enterococcus faecalis ATCC 19433 a Stafylococcus aureus ATCC 25923.

V prípade kmeňov Salmonella sa očakáva vynikajúci vývoj, zatiaľ čo Escherichia coli Môže mať slabý alebo pravidelný vývoj a gram pozitívne kmene (Enterococcus a Staphylococcus) sú čiastočne alebo úplne inhibované.

odporúčania

-Pretože toto médium neinhibuje rast proteusu, niektoré laboratóriá zvyčajne kladú 40 mg/l novobiocínu, aby sa zabránilo vývoju tohto mikrobiálneho kmeňa. Antibiotikum sa musí pridať pred roztokom jódia jodu.

-Po príprave média vrátane roztoku jódu jódu by nemalo tráviť viac ako 2 hodiny, aby sa naočkovalo.

-V čase distribúcie média v skúmavkách musí byť zmes homogenizovaná nepretržite, aby sa vytvorila vytvorená zrazenina.

-V menej kontaminovaných vzorkách sa inkubujú vzorky 35-37 ° C a vo veľmi znečistených vzorkách sa odporúča inkubácia pri 43 ° C.

Odkazy

1. Médium BBL. 2005. Pripravené v trubici na pestovanie druhov salmonelly.
2. Forbes B, Sahm D, Weissfeld a. (2009). Mikrobiologická diagnostika Bailey a Scott. 12 ed. PAN -AMERICKÁ REDICIAL S.Do. Argentína.