Nadácia Peptonada, príprava a použitia

On peptonada Je to prostriedok na obohatenie kvapaliny, nie selektívny, používaný hlavne ako riedidlo vzoriek potravín alebo iných materiálov. To znamená, že z chemického hľadiska je veľmi jednoduché, obsahuje peptón mäsa, chloridu sodného a vody.

Má určitú výživovú hodnotu, ktorá umožňuje obohatiť vzorku. Ak sú zbité baktérie, toto médium má výkon na opravu životaschopnosti. Je to užitočné najmä pri regenerácii baktérií patriacich do rodiny Enterobacteriaceae.

Voda peptonada v pohári. Zdroj: MSC. Marielsa Gil

V prípade regenerácie Salmonellas sa odporúča použitie tlmivého variantu vody Peptonada; Toto slúži ako prostriedok predbežného obohatenia vzorky, v tomto prípade obsahuje ďalšie prvky, ako je dysótický fosfát a fosforečnan dipo-fosforečnanu.

Normálne voda Peptonada pripravuje neutrálne pH, existujú však aj ďalšie varianty, kde je pH potrebné na 8,5 ± 0,2 (alkalické), pretože baktérie, ktoré sú určené na izoláciu, sú alkalofily Vibrio cholerae.

Na druhej strane, toto médium sa môže použiť ako základné médium na testy fermentácie uhľohydrátov.

[TOC]

Základ

Peptony poskytujú živiny potrebné pre bakteriálny vývoj, najmä dusík a aminokyseliny s krátkym reťazcom, zatiaľ čo chlorid sodný si udržuje osmotickú rovnováhu.

Okrem toho médium umožňuje rozptyľovať, homogenizovať a opravovať bakteriálne bunky, ktoré boli poškodené podriadením sa priemyselným procesom.

Pretože riedidlo je ideálny, účinne nahradí fyziologický roztok (SSF) alebo roztok tlmenia fosfátov (PBS).

Bakteriálny rast sa stáva zrejmou pozorovaním zákalu toho istého.

Príprava

Domáce (nekomercia) príprava

Vážiť 1 g z peptónu a 8,5 g chloridu sodného, ​​rozpustite sa v 1 litri destilovanej vody. PH musí byť upravené na 7.0. Na tento účel môžete použiť chlorid sodný 1 n.

Môže vám slúžiť: prechodné plodiny

Príprava pomocou komerčného média

Vážiť 15 g dehydratovaného média a rozpúšťajte sa v liter destilovanej vody. Homogénne zmes. Ak je to potrebné, zmes sa varí 1 minútu, aby sa celkový roztok pomohol. Podávajte podľa potreby v 100 ml nádobách alebo 10 ml skúmavkách. Autoclavar pri 121 ° C počas 15 minút.

Ochladiť a používať v chladničke. Konečné pH média je 7,2 ± 0,2.

Farba dehydratovaného média je ľahká a pripravená béžová je priehľadná jantárová.

Príprava na fermentačné testy

K predchádzajúcej príprave - po sterilizácii - sa uhľohydrát by sa mal pridať do konečnej 1%koncentrácie, plus indikátor Andrade (kyselina fuchsín) alebo červený fenol (0.018 g/l). Trubice by mali byť umiestnené Durham Bell na pozorovanie tvorby plynu.

Ostatné varianty vody Peptonada

-Voda z pufrovanej Peptonada

Obsahuje enzymatický kazeín hydrolyzovaný, chlorid sodný, dihydrogénny fosfát draslíka a vodíkového sodného dodekahydrátu fosforečnanu sodný. Konečné pH je 7,0 ± 0,2.

Na prípravu zaťažte 20 GR dehydratovaného média a rozpustite sa v 1 litri destilovanej vody. Odísť približne 5 minút. Zahrievajte 1 minútu, kým sa úplne nerozpustí.

Nalejte primerané nádoby podľa potreby. Sterilizovať pomocou autoklávu pri 121 ° C počas 15 minút.

-Alkalická voda

Vážiť 25 g dehydratovaného média a rozpustite sa v 1 litri vody. Postupujte podľa vyššie uvedeného. PH sa pohybuje od 8,3 do 8,7.

Využitie

Inokulum sa vykonáva priamym umiestnením vzorky.

Používa sa na zriedenie vzoriek, najmä ak existuje podozrenie, že môžu dôjsť k poškodeniu baktérií. Všeobecne sú riedenia 1:10 a 1: 100.

Môže vám slúžiť: Prečo huby nevyrábajú svoje vlastné jedlo?

Inkubuje sa 24 hodín v aerobióze pri 35-37 ° C.

Vzorky stolice

Pre vzorky stolice pri hľadaní salmonely sa ako prostriedok predbežnej Enrique odporúča používanie tlmivej alebo pufrovanej vody.

Ak to chcete urobiť, postupujte takto:

Ak sú výkaly vytvorené, aby sa odobrala 1 g vzorky. Ak sú tekuté, vezmite 1 ml výkalov a zaveste v trubici s 10 ml pufrovanej vody Peptonada Voda. V prípade rektálnych tampónov si stiahnite materiál obsiahnutý v tampóne v trubi.

Vo všetkých prípadoch veľmi dobre premiešajte a homogenizujte vzorku.

Inkubujte pri 37 ° C po dobu 18 až 24 hodín. Následne subkulturálna v obohatenom vývaru ako vývar selenita cystínu alebo tetratiátu pri 37 ° C počas 18-24 hodín viac. Nakoniec rastú vo selektívnych médiách pre Salmonella, ako napríklad Agar SS, Agar XLD, Hektoen Agar,.

Vzorky jedla

Voda Peptonada sa používa ako prostriedok na obohatenie alebo ako jednoduchý riedidlo, ale ak sa hľadajú druhy salmonely.

V jedle pokračujte takto:

V prípade tuhých potravín ľutujte 25 g zo vzorky a pre tekuté potraviny, zmerajte 25 ml rovnakých. Vložte túto časť do pohárov obsahujúcich 225 ml vody z Peptonada. Zmiešať a homogenizovať vzorku.

Ak existuje podozrenie, že mikrobiálne zaťaženie je vysoké, je možné vykonať sériové alebo desatinné riedenia, aby sa uľahčil počet kolónií tvoriacich jednotiek (UFC).

Počet riedení bude závisieť od typu vzorky a analytických skúseností.

Ak je naopak podozrenie, že mikrobiálne zaťaženie je veľmi nízke, nie je potrebné vykonávať riedenia. Následne subjektívne vo selektívnych médiách.

Môže vám slúžiť: kataláza: Charakteristiky, štruktúra, funkcie, patológie

V prípade jedla z mora, ako sú morské plody, ryby, okrem iného, ​​pri hľadaní Vibrio cholerae alebo iné druhy Vibrio, voda Peptonada upravená na pH 8,5 (alkalická voda Peptonada) by sa mala použiť (alkalická peptonada).

Qa

Z každej pripravenej časti musí jedna inkubovať dve trubice bez naočkovania 24 hodín v aerobióze pri 37 ° C. Čas skončil, nemalo by sa pozorovať zákal alebo zmena farieb.

Na vyhodnotenie jeho účinnosti sa môžu použiť známe kontroly:

Na tento účel môžete použiť nasledujúce bakteriálne kmene: Escherichia coli ATCC 25922, Escherichia coli ATCC 8927, Stafylococcus aureus ATCC 6538, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Salmonella typhimurium ATCC 1428, Salmonella Enteritidis ATCC 13076.

Vo všetkých prípadoch sa očakáva uspokojivý mikrobiálny vývoj, ktorý je pozorovaný zákalom životného prostredia.

Obmedzenia

-Dehydratované médium je veľmi hygroskopické, takže sa musí udržiavať ďalej od vlhkosti.

-Médium by sa nemalo používať, ak sa pozoruje akýkoľvek typ zhoršenia.

-Dehydratované kultivačné médium by sa malo udržiavať medzi 10 - 35 ° C

-Pripravené médium musí byť udržiavané v chlade (2-8 ° C).

Odkazy

1. Camacho A, Giles M, Ortegon A, Palao M, Serrano B a Velázquez alebo. Techniky pre potravinovú mikrobiologickú analýzu. 2009, 2. vydanie. Fakulta chémie, UNAM. Mexiko. Verzia pre manuálne a dokumenty administrátor (AMYD) Fakulty chémie, UNAM 1. K dispozícii na: http: // depa.Frame.Žobrák.mx
2. Británske laboratóriá. Voda z pufrovanej Peptonada. 2015. Dostupné na: BritánAlab.com
3. Neogen laboratórium. Peptonada. K dispozícii na: Potravinová bezpečnosť.Neogén.com
4. Británske laboratóriá. Peptonada. 2015. Dostupné na: BritánAlab.com
5. Merck Laboratories. Peptonada tlmí vodu. K dispozícii na: Merckmillipore.com
6. Laboratóriá Conda pronadisa. Alkalická voda. K dispozícii na: Condalab.com
7. Forbes B, Sahm D, Weissfeld a. (2009). Mikrobiologická diagnostika Bailey a Scott. 12 ed. PAN -AMERICKÁ REDICIAL S.Do. Argentína.