Nadácia Hektoen, príprava a použitia

On Agar o Agar Hektoen Enteric je pevné, selektívne a diferenciálne kultivačné médium. Kráľ a Metzger to vytvorili v Hektoenovom inštitúte na izoláciu enteropatogénnych baktérií žánrov Shigella a Salmonella.

The medium is composed of peptone protein, yeast extract, bile salts, lactose, sucrose, salicin, sodium thiosulfate, sodium chloride, iron citrate, ammonium citrate, bromool blue, acid fuchsin and agar and agar. Táto formulácia umožňuje rozlíšiť žánre Shigella a Salmonella od zvyšku baktérií schopných rásť v tomto médiu.

Do. Hektoen virgen b ague b. Vysiate agar. Zdroj: Flickr.com/Original Uploader bol Philippinjl na francúzskej Wikipédii. [CC BY-SA 2.0 fr (https: // creativeCommons.Org/licencie/By-SA/2.0/fr/skutok.in)]

Aj keď existujú aj iné médiá s rovnakou funkciou ako agar Hektoen, má to väčšiu výhodu v porovnaní s inými médiami, najmä ak chcú obnoviť druhy Shigella.

Druhy oboch rodov spôsobujú vážne gastrointestinálne problémy v ľudskej bytosti v dôsledku konzumácie kontaminovaných potravín; Preto je prenos fekálny - ústny. Preto je použitie agaru Hektoen naznačené hlavne v mikrobiologickej analýze výkalov a vzoriek potravín.

[TOC]

Základ

Hektoen agar obsahuje peptony a kvasinkový extrakt ako zdroj živín, ktoré poskytujú základné prvky pre mikrobiálny vývoj.

Má však aj žlčové soli, ktoré pôsobia inhibujúce rast niektorých baktérií, najmä gram pozitívny a niektoré gramové negatívne. Z tohto dôvodu sa považuje za selektívne médium.

Na druhej strane, agar Hektoen je diferenciálne médium. Túto vlastnosť je udelená prítomnosťou fermentovateľných sacharidov, ako je laktóza, kreslenie a salicyín, vedľa indikátorového systému pH, ktorý predstavuje bromotimol modrá a kyselina fuchsin.

Môže vám slúžiť: Sismonetia

Všetky baktérie schopné rásť v tomto médiu, ktoré nepatria do rodu Salmonella a Shigella, sa vyvinú lososa alebo oranžové kolónie, s výnimkou rodového proteusu. Je to kvôli fermentácii jedného alebo viacerých prítomných uhľohydrátov, ktoré okyslí médium, čo spôsobuje, že indikátor pH sa otočí.

Na druhej strane, rod Shigella a Salmonella nie je schopný fermentovať žiadny z prítomných uhľohydrátov, pričom ako zdroj energie používajú iba peptóny, ktoré alkalizuje médium, a preto ich kolónie sú zelene modré.

V tomto médiu sa v tomto médiu môžu rozlíšiť baktérie schopné tvoriť sírovodík (bezfarebný plyn). Tiosíran sodný pôsobí ako zdroj sulfidu, zatiaľ čo citrát železa je odhaľujúcim činidlom. Obe zlúčeniny umožňujú tvorbu čiernej zrazeniny sulfidu železa, ktorý ukazuje reakciu.

Čierna zrazenina v strede kolónie s priehľadným halo okolo dáva vzhľad rybieho oka. Táto funkcia naznačuje prítomnosť žánru Salmonella.

Nakoniec chlorid sodný udržiava osmotickú rovnováhu a agar poskytuje životnému prostrediu pevnú konzistenciu.

Príprava

Vážiť 76 g gr dehydratovaného média a rozpúšťať sa v liter destilovanej vody. Dajte si pozor na zmes a potom nechajte v pokoji 10 až 15 minút. Môže sa zahriať a variť, čo dáva rotačné pohyby až do celkového rozpustenia. Toto médium nie je v autokláve sterilizované.

Keď médium dosiahne približnú teplotu 45 ° C Objem 20 ml v petri sterilných doštičkách sa priamo naleje.

Môže vám slúžiť: Populačná dynamika

Agar je spevnený. V tom čase sú už pripravení na použitie. Je vhodné ich okamžite používať. Ak nie je možné, sú držané v chladničke až do ich použitia.

Doštičky musia byť odstránené vopred z chladničky, než ich zasiatím, aby sa vzala okolitá teplota.

Médiové pH musí byť 7,5 ± 0,2. Farba dehydratovaného média je fialová a pripravená farba je hnedá zelená.

Využitie

Použitie agaru Hektoen sa odporúča na hľadanie baktérií rodu Shigella a Salmonella vo vzorkách potravín a potravín.

Možnosť izolácie týchto baktérií sa výrazne zvýši, ak je vzorka v špeciálnych vývaroch predtým obohatená.

Inokulum musí byť silné a výsadba sa vykonáva stripzitou. Doštičky sa inkubujú pri 37 ° C počas 24 až 48 hodín pri aerobióze.

Inkubácia na 48 hodín sa odporúča, pretože charakteristiky kolónií sú v súčasnosti jasnejšie pre interpretáciu a diferenciáciu.

Qa

Na vykonanie kontroly kvality v tomto médiu sa používajú certifikované bakteriálne kmene, napríklad: Salmonella typhimurium ATCC 14028, Salmonella Enteritidis ATCC 13076, Shigella Flexneri ATCC 12022 a Shigella Sonnei ATCC 25931.

Očakávané výsledky sú nasledujúce: Salmonella typhimurium a  Salmonella Enteritidis Musia sa rozvíjať zelené - moderné kolónie s čiernym centrom alebo bez nej. Zatiaľ čo druhy Shigella budú rásť ako zelené - moderné kolónie.

Môžete tiež zahrnúť kmene Escherichia coli ATCC 29212, Proteus mirabilis, Klebsiella pneumoniae ATCC 700603, Enterococcus faecalis ATCC 29212 a Stafylococcus aureus ATCC 25923.

Môže vám slúžiť: Lactosado vývar

V týchto prípadoch sú pozorované charakteristiky nasledujúce: A. coli a Klimatizovať. pneumónia Budú sa vyvíjať v týchto stredných kolóniách, ktoré zafarbia losos na oranžovú farbu s zrazeninou rovnakou farbou okolo. Zatiaľ čo proteus vyvinie modro-zelené kolónie s čiernym centrom alebo bez nej.

Zatiaľ čo Siež. aureus a  A. Faecalis Musia byť niekedy inhibovaní A. Faecalis dokáže rásť ako žlté, veľmi malé kolónie.

Na druhej strane, pretože toto médium nie je v autokláve sterilizované, je dôležité vyhodnotiť sterilitu média. Preto z každého pripraveného pozemku musia byť inkubované z jednej do dvoch doštičiek bez naočkovania 37 ° C počas 24 hodín pri aerobióze.

Je zrejmé, že na tanieri sa neočakáva žiadny rast.

Obmedzenia

-Druhy proteus sa môžu vyvíjať v tomto médiu a charakteristiky ich kolónií sa môžu zamieňať so salmonelou alebo druhmi Shigella. Z tohto dôvodu musí byť každá podozrivá kolónia potvrdená biochemickými testami.

-Je potrebné sprevádzať použitie tohto média s ostatnými menej selektívnymi vekmi, pretože ak je vyhľadávaný mikroorganizmus v nízkej koncentrácii, nemohol sa vyvinúť v tomto médiu.

-Počas prípravy sa neprehrievajte, pretože nadmerné teplo mení zloženie životného prostredia.

-Nezvyčajne sa môžu objaviť kolónie laktózy fermentujúcej samonella, ktorá môže zostať bez povšimnutia.

Odkazy

1. Prispievatelia Wikipedia. Enterický agar Hektoen. Wikipedia, bezplatná encyklopédia. 13. marca 2019, 23:38 UTC. DOSTUPNÝ V: .Wikipedia.Org/ prístup 16. marca 2019.
2. BD Laboratories. Bd hektoen enterrikový gang (on gank). 2013. K dispozícii na: BD.com
3. Británske laboratóriá. Agar Hektoen. 2015. Dostupné na: BritánAlab.com
4. Diffco laboratóriá Francisco Soria Melguizo. Agar. K dispozícii na: F-Soria.je
5. Diffco & BBL Manual, Hektoen Enterric Agar. 2. vydanie. K dispozícii v: BD.com/Európa