Nadácia Agar XLD, príprava a použitia

On Agar XLD o Acho Xilosa LySine Desoxicate je selektívna a diferenciálna tuhá kultúra pre enteropatogénnu izoláciu. Taylor navrhol vzorec XL Agar (xylóza, lyzín), aby sa zlepšila izolácia rodu Shigella.

Poznamenal, že tento žáner bol inhibovaný vo väčšine médií určených na izoláciu enteropatogénu. Následne bol pridaný dexikolovaný sodný, tiosíran sodný a železitý amonický citrát, aby sa zvýšila jeho selektivita. Ukázalo sa, že tento vzorec je užitočný pre Shigellu a izoláciu Salmonella.

Rozdiely od kolónií Shigella, Salmonella a Coliforms v Agar XLD. Do. Shigella sp, b. Salmonella SP, C. Koformovať. Zdroje: a. Autor: CDC/ Amanda Moore, MT; Todd Parker, PhD; Audra Marsh, zdvorilosť: knižnica image v oblasti verejného zdravia B. https: // nahrávanie.Wikimedia.org/wikipedia/commons/1/1f/salmonella_species_growing_on_xld_agar _ -_ show_h2s_production _-_ detail.Jpg c. Autor: CDC/DR. J. J. Farmár, zdvorilosť: knižnica image v oblasti verejného zdravia

Agar XLD sa skladá z kvasinkového extraktu, sodíka, xylózy, lyzínu, laktózy, sacharózy, tiosíranu sodného, ​​citranu amónneho železitého, chloridu sodného, ​​červeného fenolu a agaru a agaru a agaru a agaru a agaru. Vo väčšine bakteriologických laboratórií sa Agar XLD a SS Agar Duo používa na štúdium vzoriek stolice pri hľadaní Shigella a Salmonella.

Ostatné laboratóriá uprednostňujú kombináciu Chromagar Salmonella a Agar XLD, okrem iných dostupných možností. Tieto duvy sa dajú pripraviť na dvojité petrie taniere. Na jednej strane umiestnia agar xld a na opačnej strane, druhé zvolené médium.

[TOC]

Základ

-Výživa

Agar XLD má kvasinkový extrakt, ktorý slúži ako zdroj živín pre mikroorganizmy, ktoré sa vyvíjajú v tomto agari. Okrem toho prítomnosť uhľohydrátov (xylóza, sacharóza a laktóza) poskytuje energiu baktériám, ktoré ich môžu kvasiť.

-Stredná selektivita

Ako inhibičná látka predstavuje usporiadanie sodíka; To bráni rastu gramne pozitívnych baktérií, čo dáva strednemu selektívnemu charakteru.

-Diferenciálna sila

Typické kolónie Shigella

Ako už bolo spomenuté, XLD agar obsahuje xylózu; Tento uhľohydrát je fermentovaný všetkými baktériami, ktoré rastú v tomto médiu, s výnimkou rodu Shigella.

Môže vám slúžiť: Hardy-Weinbergov zákon

Toto je jedna z charakteristík, ktorú ponúka jeho diferenciálny charakter, pretože Shigellove kolónie rozlišujú zvyšok vývojom červených kolónií, zatiaľ čo ostatné baktérie produkujú žlté kolónie.

Typické kolónie Salmonella

Rodová salmonella tiež feruje xylózu a spočiatku vytvára žlté kolónie. Po vyčerpaní xylózového uhľohydrátu však útočí lyzín svojím enzýmovým lyzínovou dekarboxylázou. Lyzínová dekarboxylácia generuje alkalis, ktoré vytvárajú farbu kolónie a pôvodnú červenú na pôvodnú červenú.

Toto správanie sa vykonáva iba Salmonella, pretože koliformami, ktoré dekarboxyle. Dôvodom je, že prítomné koliformné fermenty laktózy a sacharózy sú prítomné; Preto je produkcia kyseliny veľmi vysoká a v týchto baktériách ponecháva žltá kolónia.

Malo by sa poznamenať, že rodová samonella nepredložila sacharózu ani laktózu.

H₂Siež

XLD agar tiež umožňuje detegovať druhy výrobcov Salmonel z H₂S; Za týmto účelom má zdroj sulfidu predstavovaný tiosulfátom sodným a vývojárom reakcie, ktorým je citrát z amoniak.

Ten reaguje s H₂S (bezfarebný plyn) a tvorí viditeľnú čiernu zrazeninu nerozpustný sulfát železa. V tomto zmysle budú charakteristiky Salmonellových kolónií červené s čiernym centrom.

Je potrebné poznamenať, že na reakciu h₂S, je potrebné alkalické pH. Preto iné enterobaktérie, ktoré tvoria h₂V tomto prostredí to nemôžu urobiť alebo to urobiť zle, pretože vysoká kyslosť, ktorú produkujú pri fermentácii uhľohydrátov, predstavuje inhibovanie alebo bránenie reakcii.

-Chlorid sodný, agar a fenol červené

Nakoniec chlorid sodný udržiava osmotickú rovnováhu; Agar je spevňovacie činidlo a červená fenol detekuje zmeny pH a otáča farbu kolónií a média.

Príprava

Vážiť 55 g gr dehydratovaného XLD a rozpúšťajte sa v 1 litri vody. Zohrejte a potriasť zmesou, až kým nedosiahne bod varu. Nehádajte sa, pretože teplo poškodzuje médium a vytvára zrazeninu, ktorá mení morfológiu typických kolónií.

Môže vám slúžiť: Proteoglycans

Toto médium by sa nemalo autoklávovať. Pri rozpustení musíte prejsť do kúpeľne z 50 ° C. Pri chladení by sa malo podávať priamo na Petriho sterilných platniach. Môžu byť vyradení na jednoduché taniere alebo dvojité taniere. Môžu sa upevniť a udržiavať v chladničke až do použitia.

Pred použitím. Rovnako ako médium, ktoré nie je v prevádzke, sa odporúča pripraviť ho blízko k dátumu používania.

Konečné pH média musí byť na 7,4 ± 0,2. Farba pripravených je oranžová červená, priesvitná, bez zrazeniny.

Ak existuje lyzínový xylózový agar (XL), sodný, tiosíran sodný a amonický citrát železa sa môže pridať. Týmto spôsobom sa získa vzorec XLD Agar.

Žiadosti

Agar XLD sa používa na zotavenie enteropatogénov, najmä rodu Shigella a sekundárne rodovej salmonely. Je užitočné na hodnotenie vzoriek stolice, vody a potravín.

Typy vzoriek

Stolica

Vzorky stolice môžu byť zasiate priamo do agaru XLD, čím sa dosiahne dobré rozdelenie materiálu na získanie izolovaných kolónií.

Na zlepšenie zotavenia salmonel, XLD súhlasil s obohacujúcimi prostriedkami pre Salmonella, je možné vysiať.

Jedlo

V prípade potravín sa môžu obohacovacie vývary použiť na Salmonella a Shigella. Pre Salmonella môžete okrem iného používať vývar Selenito, jasne zelený tetrracionát.

V prípade Shigella môže byť obohatený o vývar shigella 0,5 um/ml Novobiocina, inkubovaný pri 42 ° ± 1 ° C počas 16-20 hodín.

Vodná voda

Pri analýze vody sa odporúča okrem iného technika membránovej filtrácie a použitie XLD Agar.

Vasiate a identifikačné podmienky

Pasiace médium sa inkubuje pri aerobióze pri 35 ° C počas 24 až 48 hodín.

Môže vám slúžiť: Flora a fauna v Indii

Pozorované sú typické kolónie každého žánru, podozrivé kolónie by sa mali vykonávať biochemické testy na identifikáciu.

Qa

Na vyhodnotenie kontroly strednej kvality je možné použiť tieto bakteriálne kmene: Salmonella typhimurium ATCC 14028, Salmonella Enteritidis ATCC 13076, Húževnatosť Salmonella DSM 4224, Shigella Flexneri ATCC 12022, Shigella Sonnei ATCC 25931, Escherichia coli ATCC 25922, Proteus mirabilis ATCC 43071, Klebsiella pneumoniae ATCC 33495.

Rod Salmonella sa vyznačuje prezentáciou v týchto stredne červených kolóniách s čiernym stredom alebo úplne čiernymi kolóniami. Zatiaľ čo v rode Shigella musia byť kolónie červené, to znamená farbu média.

V prípade Escherichia coli Očakáva sa, že bude úplne alebo čiastočne inhibovaná; Ak kolónie rastú, sú žlté. Pre Proteus mirabilis Očakáva sa s ružovými kolóniami s ružovými kolóniami s čiernym centrom alebo bez nej. Nakoniec, rod Klebsiella bude rásť ako žlté kolónie.

Konečné úvahy

Agar XLD sa veľmi používa v bakteriologických laboratóriách na svoju vysokú účinnosť na regeneráciu Shigella a má tiež dobré zotavenie rodu Salmonella.

RALL A COLOBOLATEROV (2005) vo svojej práci s názvom „Hodnotenie troch obohacovacích bujónov a piatich tuhých médií na detekciu Salmonella v hydine“ ukázali, že z 3 klasických médií (jasne zelený agar, agar a agar xld), agar xld získal najlepšiu mieru zotavenia.

Percentá zotavenia boli nasledujúce: 13.8% pre jasne zelený agar, 27.6% pre SS a 34.5% pre XLD. Bol prekonaný iba chromogénnym médiom Agar Rambach so 48% zotavením a Chromagarom so 79.3%.

Odkazy

1. Choroby prenášané potravinami. Shigelóza. K dispozícii na: anmat.Vláda.ar
2. "Agar xld.".„ Wikipedia, encyklopédia zadarmo. 9. februára 2019, 11:46 UTC. 10. apríla 2019, 19:25 Wikipedia.orgán
3. Laboratóriá BBL. Chromagar Salmonella / BD XLD agar (BIPACCA).2013 k dispozícii na: BD.com
4. Laboratórium. Neogén. Agar XLD. K dispozícii na: Potravinová bezpečnosť.Neogén
5. Laboratórium Francisco Soria Melguizo. Agar XLD. K dispozícii na: http: // f-soria.Je/informovať
6. Rall L, Rall R, Aragon C, Silva M. Hodnotenie troch obohacovacích brutkov a piatich pokovovacích médií na detekciu Salmonella v hydine. Braz. J. Mikrobiol.  2005; 36 (2): 147-150. K dispozícii od: SCIELO.Br
7. Forbes B, Sahm D, Weissfeld a. (2009). Mikrobiologická diagnostika Bailey a Scott. 12 ed. PAN -AMERICKÁ REDICIAL S.Do. Argentína.