Kukuričná múka. Základ, príprava a použitie

On Agar kukurice Je to pevné kultivačné médium, nízka výživová sila, užitočná pre subkultúrnu Candida albicans. V angličtine je známy ako kukuričný stravu agar.

Stredne konvenčná kukuričná múka má veľmi jednoduché zloženie, obsahuje kukuričnú múčku, agar a vodu. Vďaka svojej nízkej výživovej úrovni je ideálne ju používať pri udržiavaní plesňových kmeňov na mierne časové obdobie, najmä čierne huby.

Do. Grafické znázornenie komplexu Candida albicans v agari z kukuričnej múky. B. Clamidospora z komplexného pohľadu Candida albicans na mikroskop, vytvorený v kukuričnej múke. Zdroj: a. Grahamcolm [CC BY-SA 3.0 (https: // creativeCommons.Org/licencie/By-SA/3.0)]/ b. Autor: CDC/DR. William Kaplan, s láskavým dovolením: knižnica image v oblasti verejného zdravia.

Komplexná sporulácia Candida albicans Uprednostňuje sa v tomto médiu, ak sa pri príprave agaru pridá 1% Tween 80. Tvorba Clamidospores je charakteristický pre tento druh a prakticky jediný, ktorý ovplyvňuje ľudskú bytosť.

Existujú aj iné druhy, ktoré tvoria camidospory, ale je nepravdepodobné, že by ovplyvnili človeka, ako napríklad Candida Australis, prítomné v exkremente tučniakov, alebo C. Clausenii, čo je saprophyt zriedka nájdený. Tiež výnimočne tento druh C. Hviezdny a C. tropicalis Mohli ich vytvoriť.

Na druhej strane, pridanie glukózy do strednej kukuričnej múky uprednostňuje tvorbu pigmentov v kmeňoch Trichophytom rubrum.

Je dôležité zdôrazniť, že existujú huby, ktoré nevytvárajú hyphaify, ani pseudohifas v záchvatovej kukuričnej múke, ako napríklad Cryptococcus neoformans, odlišujúce sa od iných žánrov.

Agar kukuričnej múky sa môže pripraviť aj v laboratóriu alebo komerčných médiách.

[TOC]

Základ

Kukuričná múka je substrát, agar je tuhé činidlo a voda je rozpúšťadlo.

Agar kukuričnej múky môže byť doplnený Tween 80 (polyester 80 sorbitita monoolát alebo polysorbát). Táto zlúčenina znižuje povrchové napätie životného prostredia svojím emulgátorovým výkonom.

Môže vám slúžiť: fosfatidylinozitol: štruktúra, tréning, funkcie

Vytvára tiež nepriateľskú atmosféru, ktorá inhibuje prehnané násobenie buniek a stimuluje rast hýf, čo tiež uprednostňuje produkciu camidosporov; Posledne menované zvážilo rezistentné štruktúry. Táto štruktúra pomáha pri identifikácii druhu Candida albicans.

Pokiaľ ide o svoju časť, glukóza v tomto médiu zvyšuje kapacitu tvorby pigmentov niektorých húb.

Je potrebné poznamenať, že stredná kukuričná múčnaOmpleJo Candida albicans.

Príprava

Domáca kukuričná múka Apar

Vážiť 47 g žltej kukuričnej múky a rozpúšťajte sa v 500 ml destilovanej vody. Teplo na 60 ° C, zatiaľ čo príprava je rozrušená v približnom období 1 hodiny. Potom filtrujte cez kúsok gázy a bavlny, voliteľne ho môže znova filtrovať cez filtračný papier Whatman č. 2.

Dokončite objem pri 1000 ml destilovanou vodou. Pridajte 17 GR agar-voda, teplo, aby ste sa rozpustili. Autoclavar počas 15 minút pri 121 ° C.

Podávame v Petri sterilných platniach. Ušetrite v chladničke.

Farba pripraveného média je belavá s hrudkovým vzhľadom.

Ak chcete pripraviť kukuričnú múčku s glukózou na prípravku opísanú vyššie, aby ste pridali 10 g glukózy.

Komerčný agar kukurice

Zvážte 17 g gr dehydratovaného média a rozpustite sa v 1 litri destilovanej vody. Zmes sa môže zahriať, jemne miešanie, aby sa úplne rozpustila. Sterilizovať v autokláve pri 121 ° C, 15 lb, počas 15 minút.

Nalejte na Petriho sterilné taniere. Nechajte stuhnúť. Investovať a ušetrite do chladničky, kým sa nepoužívate. Pred použitím.

PH musí byť 6,0 ± 0,2 až 25 ° C.

Agar kukuričnej múky s Tween 80

Aby sa dodržiaval štandard ISO 18416, agar z kukuričnej múky musí byť pripravený nasledovne:

Môže vám slúžiť: acetyl coenzým do

Vážte 65 GR na liter a pridajte 10 ml Tween 80. Zahrievajte a varte niekoľko minút, kým sa nerozpustíte, a dávajte pozor, aby ste príliš neprehrievali príliš veľa. Sterilizovať pri 121 ° C počas 15 minút.

Agar kukuričnej múky s glukózou

Na zlepšenie chromogénnej sily kolónií Trichophyton rubrum a odlíšiť od Tón. Mentagrofyty, Je možné pridať 0,2% glukózu k pôvodnému vzorcu. Nemusí mať Tween 80, pretože glukóza inhibuje tvorbu camidosporov.

Využitie

Hlavne použitie agaru kukuričnej múky je určené na štúdium kmeňov Candida, čo pomáha jeho identifikácii prostredníctvom charakteristického pozorovania chloidosporov u druhov albicans. To znamená, že použitie tohto agaru slúži ako pomocný spôsob identifikácie týchto kvasiniek.

V tomto agari sa môže vyvinúť saprofytické aj patogénne druhy, ale každá forma charakteristických myceliálnych štruktúr. Napríklad druhy rodu Torulopsis neprodukujú mycélium a reprodukujú sa iba blastoconidiou.

Podobne druhy Trichhosporon a Geotrichum produkujú artrokonídiu v kukuričnej múke a niekedy je ťažké rozlišovať medzi jedným a druhým.

Genotrichum's Artrroconidia vyvoláva rozšírenie hýf pripomínajúcich hokejovú palicu.

Produkcia pigmentu pomocou kukuričnej múky s dodávkou glukózy je užitočná pri identifikácii Trichophytom rubrum.

Vysiať

V múke agarovej múky podozrivé kolónie úprimné. Médium je zasiate a inkubuje sa pri 22 ° C počas 24 až 48 hodín. V prípade potreby sa dá predĺžiť inkubačný čas.

Demonštrácia camidosporov

Na tento účel sa musí agar kukuričnej múky s Tween 80 naočkovať pomocou techniky Dalmau. Táto metóda spočíva v tom, že s platinou zvládnete časť podozrivej kolónie a urobíte tri paralelné rezy v strede, udržiavajte rukoväť na 45 °. Rezy musia byť oddelené vo vzdialenosti 1 cm medzi jedným a druhým.

Môže vám slúžiť: Flora a fauna z Afriky: Reprezentatívne druhy

Následne je umiestnený predtým ohýbaný predmet cez zasiahnuté značky, takže zakrytá polovica a druhá objavená.

Inkubujte dosky vysadené pri 30 ° C počas 48-72 hodín a potom preskúmajte mikroskop cez kryty.

Udržiavanie hubových kmeňov

Na údržbu kmeňov vysadené plaky a povodne sa skladujú v chladničke (4 až 8 ° C). Týmto spôsobom môžu trvať niekoľko týždňov a používať sa na výučbu alebo výskumné účely.

Qa

Pre reguláciu sterility sa inkubuje doska bez naočkovania pri teplote miestnosti, očakáva sa, že nedochádza k nárastu alebo zmene farby.

Pre kontrolu kvality môžete zasiať známe kmene, ako napríklad: Stafylococcus aureus, ATCC 6538, Escherichia coli ATCC 25922, Aspergillus Niger ATCC 16404, Candida albicans ATCC 1023, Sacharomyces cerevisiae ATCC 9763.

Očakávané výsledky sú čiastočnou inhibíciou pre Siež. aureus a A. coli. Zatiaľ čo vo zvyšku kmeňov sa očakáva uspokojivý rast.

Aspergillus Niger Rastie s čiernymi kolóniami a sporuluje sa v približnom čase 5 dní inkubácie.

Candida albicans Leveaduriformné kolónie s výrobou Clamidospores.

Sacharomyces cerevisiae produkovať veľké kvasinkové bunky.

Obmedzenia

Na spodnej časti dosky sa vytvorí žltá zrazenina, ktorá by sa nemala zamieňať s kolóniami.

Odkazy

1. Neogen laboratórium. Agar kukurice. K dispozícii na: Potravinová bezpečnosť.Neogén.com.
2. Kultivačné médiá mikrokitu. Agar kukurice. Dostupné v: mediálnej kultúre.com.
3. Linares M, Solís F. Sprievodca identifikácia kvasiniek. K dispozícii na: http: // www.vodca.Budem oživiť.
4. Urcia F, Guevara M. Otáčať sa. Peru Med.Expedovať. Public Health, 2002; 19 (4): 206-208. K dispozícii na: SCIELO.com
5. Domáci dom G. Všeobecná mykológia. 1994.  2. vydanie. Venezuelská univerzita, vydania knižnice. Venezuela Caracas.
6. Forbes B, Sahm D, Weissfeld a. (2009). Mikrobiologická diagnostika Bailey a Scott. 12 ed. PAN -AMERICKÁ REDICIAL S.Do. Argentína.
7. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologická diagnostika. 5. vydanie. PAN -AMERICKÁ REDICIAL S.Do. Argentína.
8. Hrad e. Porovnávacia štúdia niektorých makro a mikroskopických metód na izoláciu a rozpoznávanie rodu Candida. Otáčať sa. Kolumbijské farmaceutické chemické vedy. 1970; 3 (1): 33-57. K dispozícii v: Science.i.Edu.co