Agentúra sulfitu bizmutu, príprava a použitie

On sulfitový agar Je to pevná, selektívna a diferenciálna kultúra, špeciálne formulovaná na izoláciu Salmonella Enterica subgrupo enterica typhi serettypo, Medzi inými druhmi Salmonella. Prostredie je známe ako BSA súhlasí v anglickom agari sulfite bizmut.

Pôvodný vzorec sulfitu sulfitu bizmutu bol vytvorený v roku 1927 Wilson a Blair (železné médium glukózy sulfitu); Obsahoval sulfit sodný, glukózu, roztok bizmutu, citrát amónny, síran železia a agar-adding.

48 -Rast inkubácie Salmonella SP v agare sulfit bizmutu. Zdroj: pixnio.Com Autor: DR. W. R. Erving, USCDCP

V súčasnosti existuje modifikácia pôvodného média zloženého z extraktu z mäsa, pepónov mäsa a kazeínu, indikátora sulfitu bizmutu, glukózy, fosforečnanu dezodia, železného síranu, jasne zelenej a agar-agar.

Existuje veľa prostriedkov na izoláciu druhov salmonely, ale pokiaľ ide o obnovenie sérotypu Typhi, agar sulfitu bizmutu predstavuje oproti nim, pretože vo väčšine sa získa veľmi nízka alebo nulová zotavenie tohto mikroorganizmu.

Je však potrebné používať viac ako jeden typ média, pokiaľ ide o izoláciu enteropatogénneho, pretože agar sulfitu bizmula je menej účinný pre iné druhy Salmonella a pre rod Shigella, ktoré sú v tomto agari veľmi zle inhibované alebo sa vyvíjajú veľmi zle.

Je potrebné poznamenať, že zo všetkých druhov Salmonella je sérotyp Typhi jedným z najdôležitejších enteropatogénov v človeku, čo je jediný rezervoár. Táto sérovarie produkuje týfusovú horúčku, gastroenteritídu, bakteriémiu a septikémiu.

Z tohto dôvodu je dôležité zahrnúť tento agar, keď sa analyzujú vzorky vody, výkalov alebo potravín.

[TOC]

Základ

Ako väčšina kultivačných médií, sulfitový agar bizmutu obsahuje výživové látky na podporu vývoja baktérií, ako sú peptóny a extrakt z mäsa. Podobne aj glukóza funguje ako zdroj energie a uhlíka.

Môže vám slúžiť: biogenetické prvky

Teraz nie všetky baktérie budú rásť v tomto médiu, pretože agar sulfit bizmutu je selektívne médium. Obsahuje zlúčeniny, ktoré inhibujú rast gramne pozitívnych mikroorganizmov a určitých gramálnych negatívnych baktérií. Tieto zlúčeniny sú: indikátor sulfit bizmut a jasne zelená.

Na druhej strane, fosforečnan disodia udržiava osmolaritu a pH média.

Okrem toho je agar sulfitu bizmutu diferenciálnym médiom vďaka prítomnosti železného síranu, ktorý ukazuje tvorbu H₂Siež.  H₂S tvorené baktériami reaguje s železným síranom a tvorí jasne viditeľnú nerozpustnú zrazeninu.

Nakoniec, Agar -agar poskytuje životnému prostrediu solídnu konzistentnosť.

Príprava

Vážiť 52,3 g gr dehydratovaného média a rozpúšťajte sa v liter vody. Zahrejte na uvarenie zmesi počas 1 minúty s častým agitáciou, až do celkového rozpustenia. Príliš neprehrievajte. Toto médium nie je v autokláve sterilizované, pretože extrémne teplo poškodzuje kultivačné médium.

Nechajte vychladnúť pri 45 ° C a potriasť sa pred podávaním na Petri sterilných platniach. Odporúča sa vyrábať dosky s dobrou hrúbkou. Za týmto účelom musí byť na každej doske naliate 25 ml. Nechajte stuhnúť. Ako je to prostriedok, ktorý nie je sterilizovaný, je normálne, aby sa navrhovalo jeho okamžité použitie.

Štúdia od spoločnosti D'Aust v roku 1977 však ukázala, že existuje lepšie uzdravenie Salmonella typhimurium a Salmonella Enteritidis Ako bizmut sulfitu médium vek, výkon pre séroviárov nie je ovplyvnený Tyčinka a Paratyphi b.

D'Aous odporúča používať taniere do dňa 4. deň chladenia, hoci varuje, že keď médium starne, selektivita klesá a ľahšie sa rozvíja kmene Proteus vulgaris.

To je dôvod, prečo je pre veľmi znečistené vzorky, ako sú výkaly. Inak sa používa do 4. dňa jeho prípravy. Iní autori odporúčajú používať taniere deň po ich príprave, uložené v chladení.

Môže vám slúžiť: Uracil: Štruktúra, funkcie, vlastnosti, syntéza

Chladené dosky by mali byť pred použitím nálady. Médiové pH musí byť 7,5 ± 0,2. Farba neplateného média je béžová a pripravená je opalescenta zelenkavá šedá.

Žiadosti

Medzi vzorkami, ktoré sa môžu vysielať v tomto médiu, patria vzorky stolice, spotrebné vody alebo jedlo a jedlo.

Na zlepšenie izolátov sa odporúča vykonať predbežnú ošetrenie laktózovým vývarom a po obohatení o tetratačný bujón alebo selenitský vývar cystínu pred siatom v agar sulfit bizmutu sulfit.

Doštičky sa inkubujú pri 35 ° C ± 0,2 počas 24 až 48 hodín v aerobióze.

Charakteristiky kolónií v agare sulfit bizmut

Kolónie Salmonella Typhi Zvyčajne sú viditeľné v tomto agari za 24 hodín s čiernym centrom a obklopené jasne zeleným halo. Zatiaľ čo za 48 hodín sa čierna otočí úplne v dôsledku tvorby sulfidu vodíka.

Salmonella paratyphi a predstavuje kolónie s variabilnými charakteristikami. Po 18 hodinách inkubácie je možné pozorovať čierne, zelené alebo priehľadné kolónie s mukoidným vzhľadom. Zatiaľ čo po 48 hodinách sú pozorované úplne čierne a niekedy s výrazným kovovým jasom.

Siež. Paratyphi a Má tendenciu otlačiť médium okolo kolónie.

Salmonella SP Black alebo Grayercolonias Grounds, s kovovým svetlým alebo bez kovového žiarenia, sa má byť povrchom alebo nie.

Kmene koliformných sú zvyčajne úplne inhibované, ale ak rastú, vyvíjajú sa ako nepriehľadné zelené alebo hnedé kolónie a kovový jas. Nenávajte farbenie média okolo kolónie.

Obmedzenie

-Veľmi slabé inokulum môžu spôsobiť kolónie Salmonella Typhi svetlozelená, bez povšimnutia a oznamuje kultúru ako negatívnu.

Môže vám slúžiť: vetvy fyziológie

- Bizmut sulfit agar môže inhibovať zotavenie niektorých druhov salmonely, ako napríklad Siež. SendAi, s. Berta, s. Gallinarum, s. potrat-equi.

-Toto médium inhibuje väčšinu druhov rodu Shigella.

- Siež. Typhi a s. Arizona Môžu dať veľmi podobné kolónie.

-Koliformné výrobky H₂S, ako je proteus a citrobakter, produkujú kolónie podobné kolóniám Salmonella, takže je potrebné vykonať biochemické identifikačné testy.

-Na získanie izolovaných kolónií sa musí vykonať dobrá estria; Je to jediný spôsob, ako pozorovať typické charakteristiky kolónií rodu Salmonella.

Qa

Pokiaľ ide o kontrolu sterility, plak sa inkubuje bez naočkovania pri 37 ° C, očakáva sa, že nedochádza k rastu alebo zmene farby.

Pre kontrolu kvality môžete zasiať známe kmene, ako napríklad:

Escherichia coli ATCC 25922, Salmonella Enteritidis ATCC 13076, Salmonella Typhi ATCC 19430, Shigella Flexneri ATCC 12022, Enterococcus faecalis ATCC 29212.

Očakáva sa, že Escherichia coli a Shigella Flexneri sú čiastočne inhibované rozvojom zelenkavých a hnedých kolónií. Zatiaľ čo oba salmonglary musia mať vynikajúci vývoj s čiernymi kolóniami s kovovým jasom a nakoniec Enterococcus faecalis musí byť úplne inhibovaný.

Odkazy

1. Wilson, w., & E. M. MCV. Blair. Použitie glukózového bizmutu sulfitu železného média na izoláciu B. Týranie a B. Proteus. The Journal of Hygiene, 1927; 26(4), 374-391. Získaný z .Štrbina.orgán
2. D'Aust jy. Vplyv podmienok skladovania výkonnosti agar sulfitu bizmutu. J Clin Microbiol. 1977; 5 (2): 122-124. K dispozícii v: NCBI.NLM.NIH.Vláda
3. Laboratóriá IVD. Agar bizmut-sulfit podľa Wilsona-Blaira. 2009. K dispozícii na: Bismuthsulfitagar_span_jan_2009%20 (2).PDF
4. Himedia Laboratories. Sulfitový agar. 2017. K dispozícii na: HiMediabs.com
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld a. (2009). Mikrobiologická diagnostika Bailey a Scott. 12 ed. PAN -AMERICKÁ REDICIAL S.Do. Argentína.
6.  Morales R, La Cruz D, Leyva G a Ybarra M. Bakteriologická kvalita surového kozieho mlieka vyrobeného v miravalles, puebla. Rev mex ing Chem 2012; 11 (1): 45-54