Čo sú lentivírus?

Ten Lentivírus, z latinčiny šošovica Čo znamená pomalé, sú to vírus, ktorý vyžaduje dlhú dobu, medzi mesiacmi a rokmi, od počiatočnej infekcie po výskyt choroby. Tieto vírusy patria do žánru Lentivírus a retrovírus (rodina Retroviridae), ktoré majú genóm RNA, ktorý je transkribovaný na DNA pomocou reverznej transkriptázy (TR).

V prírode je lentivírus prítomný u primátov, cinlotov a mačiek. Napríklad u primátov existujú dve fylogeneticky príbuzné línie: vírusy imunodeficiencie opice (SIV) a vírusy imunodeficiencie ľudí (HIV). Obidve sú činidlá spôsobujúce syndróm získanej imunodeficiencie (AIDS).

Zdroj: PhD Dre v angličtine Wikipedia [CC BY-SA 3.0 (https: // creativeCommons.Org/licencie/By-SA/3.0)]

Lentivektor získaný z Lentivírusu sa široko používal na základný výskum v biológii, funkčnej genomike a terapii génov.

[TOC]

Fázy životného cyklu retrovírusu

Životný cyklus všetkých retrovírusu začína spojením organizmu na špecifický receptor na povrchu bunky, po ktorom nasleduje internalizácia vírusu endocytózou.

Cyklus pokračuje elimináciou vírusového krytu a tvorbou komplexu vírusového nukleoproteínu (VNC), ktorý pozostáva z vírusového genómu spojeného s vírusovými a bunkovými proteínmi. Zloženie komplexných mení v priebehu času a súvisí s konverziou TR, útočníka genómu v dvojitej vrtule DNA.

Integrácia vírusového genómu do bunky bude závisieť od kapacity vírusovej genómu preniknúť do jadra hostiteľa. Reorganizácia VNC má dôležitý dovoz v dovoze do jadra, hoci jadro ovplyvňujú aj dôležité bunkové proteíny, ako napríklad transportín-SR2/TNPO3, importín-alfa3 a importín7.

Môže vám slúžiť: Charakteristiky živých bytostí

Vírusové proteíny, ako je integrácia, a transkripčné faktory hostiteľskej bunky, ako je LEDCF, sú kľúčom k integrácii vírusového genómu.

Toto využíva strojové zariadenie hostiteľskej bunky na prepis a preklad vírusových proteínov a na zostavenie viriónov, čím sa uvoľní v extracelulárnom priestore.

Od lentivírusu po šošovník

Retrovírusový genóm má tri otvorené hodnoty (MLA) pre rôzne vírusové prvky. Napríklad kapsidia a matica (gen pút), enzýmy (gen Pol) a zabalenie (gen odoslať).

Konštrukcia vírusového vektora pozostáva z eliminácie niektorých génov divokých vírusov, ako sú gény týkajúce sa virulencie. Týmto spôsobom môže vírusový vektor infikovať eukaryotické bunky, retro-prepis, integrovať sa do genómu hostiteľskej Eukaryot buniek a exprimovať transgen (vložený terapeutický gen) bez toho, aby spôsobil ochorenie.

Metóda výstavby lentivetora je prechodná transfekcia. Je založená na použití vírusových minigenómov (nazývaných konštrukty), ktoré prepravujú iba záujmové gény. Prechodná transfekcia pozostáva z nezávislej konštrukcie konštruktov.

Niektoré retrovektory majú iba hlavné prvky na zostavenie vírusových častíc, ktoré sa nazývajú nefunkčné retrovektory. Používajú sa na transfekciu baliacich buniek.

Vektory s expresnou kazetou transgen sú schopné infikovať, transformovať bunky (transdukcia) a exprimovať transgén.

Cieľom použitia samostatných konštruktov je vyhnúť sa rekombinantným udalostiam, ktoré by mohli obnoviť divoký fenotyp.

Technológia Lentivetor

Technológia Lentivetor sa široko využíva v základných biológiách a translačných štúdiách na nadmernú expresiu transgénov stabilných, vydanie génov zameraných na miesto, umlčanie pretrvávajúcich génov, modifikácia kmeňových buniek, tvorba transgénnych zvierat a indukciu pluripotentných buniek.

Môže vám slúžiť: čo je ortogenéza?

Lentivektory tvoria ľahko manipulovateľné a vyrábať systémy. Sú integrované nezvratné a určite hostiteľský genóm. Infikujú bunky, ktoré sú alebo nie sú v delení.

Ukazujú tropizmus smerom k určitým látkam, ktoré uľahčujú terapiu. Neprimujú vírusové proteíny, takže majú nízku imunogenitu. Môžu posielať komplexné genetické prvky.

V základnom výskume sa ako interferenčné odosielanie systémov RNA (RNAI) použili lentivektory založené.

Lentivektor získaný z HIV

Na začiatku 90. rokov boli prvé Lentivektory postavené z HVI-1, ktorý úzko súvisí so SIV šimpanza. HVI-1 je zodpovedný za AIDS na celom svete.

Prvá generácia Lentivetora má významnú časť genómu HIV. Zahŕňa gény Gal a Pol, a niekoľko ďalších vírusových proteínov. Táto generácia bola vytvorená pomocou dvoch konštruktov. Jeden z nich, ktorý vyjadruje loď, dodáva funkcie balenia. Ďalší vyjadruje všetku MLA, s výnimkou prepravy.

Prenosový vektor pozostáva z expresnej kazety označenej dvoma typmi dlhých opakovaní (LTR) a génov potrebných na balenie a reverznú transkripciu.

Druhá generácia vektorov obalov nemá väčšinu doplnkových génov a ponecháva si TAT a Rev. Tieto gény boli odstránené v tretej generácii a poskytované štvrtým konštruktom.

Prenosové vektory tretej generácie sa skladajú z dvoch balení konštruktov. Jeden kóduje Gal a Pol. Ďalšie kódovanie Otáčať sa. Tretí konštrukt kóduje obálku, ktorá je odvodená od VSV-G-G. Ten, kto kóduje gén záujmu, obsahuje inaktivované sekvencie LTT LTT, aby sa zabránilo rekombinácii.

Môže vám slúžiť: Čo je binomická nomenklatúra?

V poslednom prípade regulačné prvky transkripcie zvyšujú výkonnosť prenosových génov.

Lentivektor získaný z iných vírusov

Vírus HIV-2 úzko súvisí s Magabey Gris SIV (SIV_Ty) a je zodpovedný za AIDS v západnej Afrike. Z tohto vírusu boli získané vektory prvej a druhej generácie.

Podobne ako HVI-1, od SIV_Ty, z vírusu EIAV (vírus infekčnej anémie) vírusu IVF (vírus imunodeficiencie mačacej imunodeficiencie) a vírusu vírusu biv (hovädzieho imunodeficiencie (BIV) troch generácií boli postavené. Vektory založené na EIAV boli vyvinuté na klinické použitie.

Z vírusu kaprinnej artritídy-pridefalitídy (CAEV) boli postavené vektory prvej a tretej generácie. Zatiaľ čo z IVR africkej zelenej opice boli postavené vektory prvej generácie.

Odkazy

1. Da Silva, f. H., Dalberto, T. P., Beyer Nardi, n. 2006. Okrem retrovírusovej infekcie: HIV spĺňa génovú terapiu, genetiku a molekulárnu biológiu, 29, 367-379.
2. Durand, s., Cimarelli, a. 2011. Vnútro z lentivírusového vektora. Vírusy, 3: 132-159.
3. Márai, J., Chuah, m. Klimatizovať. L., Van den Drissche, t. 2010. Posledný pokrok vo vývoji a aplikáciách lentivírusového vektora. Molekulárna terapia, 18: 477-490.
4. Milone, m.C., O'Doherty, u. 2018. Klinické použitie lentivírusového vektora. Leukémia, 32, 1529-1541.
5. SAKUMA, T., Barry, m.Do., Ikeda a. 2012. Lentivírusové vektory: základné až translačné. Biochemical Journal, 443, 603-618.