Half Stuart Foundation, príprava a použitia

On Polovica Stuart Je to poloosolidný agar alebo vývar bez živín, používaný na transport biologických vzoriek. Jeho účelom je udržiavať kmene prítomné vo vzorke životaschopné na určitý čas, ale bez zvýšenia mikrobiálnej populácie.

Vytvoril ho Moffet, Young a Stuart v roku 1948 a následne upravené Toshachom a Patsula. Skladá sa z glyceofosforečnanu sodného, ​​tioglycoátu sodného, ​​chloridu vápenatého a addingu na agar. Ten je prítomný v semi -pololidovom a neprítomnom médiu v kvapaline. Niektoré laboratóriá pridávajú metylénovú modrú.

Kultureta s prepravou Stuart. Zdroj: By: CDC/DR. Gilda Jones, s láskavým dovolením: knižnica image v oblasti verejného zdravia

Zvyčajne sa používajú, keď nie je možné okamžite zasiať vzorku. V tomto prípade je vzorka umiestnená do dopravného prostriedku, zatiaľ čo sa prenáša do laboratória, ktoré spracuje plodinu.

Týmto spôsobom je zaručené, že prítomné mikroorganizmy zostávajú nažive, až kým nie sú naočkované do zodpovedajúcich kultúrnych médií.

Spočiatku bolo jeho použitie predurčené na transport močových alebo vaginálnych vzoriek, kde prítomnosť Neisseria gonorrhoeae. Následne si uvedomili, že ich užitočnosť by mohla byť širšia.

Médium Stuart sa ukázalo byť veľmi účinné pri zachovaní labilných a nepríjemných mikroorganizmov, ako napríklad Neisseria meningitidis, Hemophilus influenzae, Pyogenes Streptococcus, Pneumónia streptococcus, Corynebacterium difteriae, Bordetella pertusis, medzi inými. Okrem iných neo -jansujúcich mikroorganizmov, ako sú enterobaktérie.

Stuartové médium sa v podstate vyhýba vysunutiu vzorky, udržiava osmotickú rovnováhu a zachováva mikroorganizmy na ideálne pH. Na druhej strane, strategicky toto médium neobsahuje živiny, čo bráni množeniu mikroorganizmov.

Na trhu existujú špeciálne predstavenia na prepravu vzoriek, ktoré obsahujú tento alebo iný dopravný prostriedok, nazývaný kultureta. Môžu sa tiež pripraviť v laboratóriu.

[TOC]

Základ

Koniec dopravných prostriedkov Stuart je udržiavať vzorky najbližšie k pôvodnému stavu, až kým nebude spracovaný.

Glyceofosfát sodný a chlorid vápenatý je tlmivý systém, ktorý pôsobí udržiavaním pH a osmolarity.

Zatiaľ čo tioglykát sodný pôsobí ako redukčné činidlo av prípade, že ho obsahuje. Nakoniec metylénovo modrá je indikátor oxidácie, to znamená, že detekuje prítomnosť kyslíka.

Môže vám slúžiť: glykosaminoglicanos: Charakteristiky a funkcie

Polotuhé médium s redoxným indikátorom je ideálne na transport vzoriek, kde je podozrivá prítomnosť anaeróbnych baktérií.

Charakteristiky dopravných prostriedkov

Stuartové médium, rovnako ako akékoľvek dopravné prostriedky, spĺňa určité charakteristiky vrátane:

-Udržiavajte životaschopné mikrobiálne kmene prítomné bez vynásobenia.

-Neobsahuje živiny; Jeho zlúčeniny sú zamerané na udržanie hydratovanej vzorky v primeraných podmienkach pH a osmolarity.

-Inhibuje autolyzované niektoré jemné mikroorganizmy, ako je pneumokok.

-Jeho použitie je dočasné, nemalo by sa predĺžiť príliš veľa.

Príprava

Polovica polotuhých Stuart s redoxným indikátorom

Domáca príprava

Prísady

Glyceofosfát sodný 10 GR

Tioglycoát sodný 1.0 gr

Chlorid vápenatý 0.1 gr

Metylén modrá 0.002 gr

Agar -agar 3 gr

Destilovaná voda 1 l

Zmiešajte komponenty a zahrievajte na celkový roztok. Nalejte do skúmaviek alebo špeciálnych esobilónov. Zavádzajú sa do autoklávu a sterilizujú sa pri 121 ° C počas 15 minút. Nechajte trubice vychladnúť zvisle (vo forme taco). Miestnosť pri izbovej teplote.

Príprava s komerčným médiom

Vážiť 14,1 g médiu v 1 litri destilovanej vody. Zahrievajte často miešanie až do celkového rozpustenia, môžete ho nechať variť. Zvyšok postupu, ako už bolo opísané.

Dehydrované médium je krém a pripravené musí byť na svojom povrchu modré. Je to kvôli prítomnosti metylénovej modrej.

PH média musí byť upravené na 7,4 ± 0,2

Polovica modifikovaná tekutina Stuart (domáca príprava)

Prísady

Glyceofosfát sodný 10 GR

Tioglycoát sodný 1 gr

Chlorid vápenatý dihydratovaný 0,1 gr

1000 ml destilovaná voda

Nesie rovnaké prísady ako polotuhá, ale nenesie agar ani metylénovú modrú farbu. V tomto prípade sú komponenty bez zahrievania zmiešané a 0,5 ml je distribuované v skúmavkách 16 x 125 mm s vekom závitu.

Sterilizuje v autokláve pri 121 ° C počas 10 minút. Pre vzorku Take -Sam.

Môže vám slúžiť: matematická biológia: História, predmet štúdia, aplikácie

Skúmavky sa skladujú pri izbovej teplote.

Žiadosti

Komerčne existujú špeciálne zariadenia na prepravu vzoriek nazývaných kultureta; Toto zariadenie je predĺžená a tenká trubica, ktorá prináša tampón vo vnútri a nakoniec je segment, ktorý obsahuje polovičné alebo tekuté médium Stuart médium.

Otvára sa zariadenie a tampónom odoberie vzorku. Potom sa znova zavedie do skúmavky, až kým sa špička tampónu vloží do média polotuhého transportu; Niektorí prinášajú polyuretánovú špongiu impregnovanú tekutým médiom Stuart, s ktorým sa vzorka zachováva pri mokrej.

V prípade, že existuje podozrenie na prítomnosť jemných mikroorganizmov.

Vzorky, ktoré sa môžu odobrať s tampónmi alebo metlami a prenesené v tomto médiu, sú hltanové exudáty, rektálne tampóny a rôzne sekréty vrátane: vaginálnych, uretres, rany, očných, otických a abscesov.

Počas prenosu vzorky v prostriedku prepravy do laboratória by sa malo vyhnúť podriadeniu životného prostredia do extrémnych prostredí (veľmi chladné alebo veľmi teplo) (veľmi chladné alebo veľmi chladné). Malo by sa tiež vyhnúť náhlym zmenám atmosférického tlaku.

Čas, v ktorom je médium schopné udržať životaschopný mikroorganizmus, bude závisieť od príslušného kmeňa. Napríklad pre mikroorganizmy rodu Neisserias a Hemophilus sa môžu udržiavať životaschopné až 24 hodín, ale kmene ako Salmonella alebo Shigella môžu vydržať dni a do týždňov.

Ak sa odhaduje, že spracovanie vzorky môže trvať viac ako 4 dni, je lepšie zmraziť vzorku pri -70 ° C.

Identifikácia vzorky v prepravných prostriedkoch

Pripravené dopravné médiá alebo komerčná kultúra musia mať štítok, v ktorom budú umiestnené nasledujúce údaje:

Meno a priezvisko pacienta: Vyhnite sa zmätkom vzorkovania.

Identifikačné číslo: Je vhodné priniesť objednávku v práci.

Zdroj vzorky: Pomôžte bakteriológovi pri výbere vhodných kultúrnych médií.

Môže vám slúžiť: zafarbenie kapsúl: Nadácia a techniky

Liečebný lekár: Niekedy je potrebné pre možné konzultácie.

Dátum a čas vzorky: Je potrebné na prijatie alebo odmietnutie vzorky podľa času, ktorý uplynul medzi vzorkou a prijatím v laboratóriu.

Ďalšie informácie, ktoré by boli veľmi užitočné pre prílohu, sú:

Presumptívna diagnóza: Sprievodca pri pridávaní špeciálnych kultivačných médií podľa diagnostického podozrenia.

Liečba antibiotík: Je užitočné byť pripojený k antibigramu.

Všetky tieto informácie sú nevyhnutné na zaručenie dobrého spracovania vzorky.

Qa

Na vyhodnotenie prevádzky média Stuart môžete naočkovať známe a udržiavané kmene pri 25 ° C, napríklad: Bordetella pertussis ATCC 9340, Hemophilus influenzae ATCC 19418, Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424, Neisseria meningitidis ATCC 13090, Pneumónia streptococcus ATCC 6301.

Vo všetkých prípadoch sa očakáva, že obnoví daný mikroorganizmus, zachovaný 24 hodín.

Na druhej strane, ďalšie kmene, ako napríklad: Shigella Flexneri ATCC 12022, Stafylococcus aureus ATCC 6538, Pyogenes Streptococcus ATCC 12344, Enterococcus faecalis ATCC 33186, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 a Escherichia coli ATCC 11775.

Vo všetkých prípadoch sa očakáva hojné zotavenie až na 96 hodín.

Obmedzenia

Niektoré štúdie zaisťujú, že glyceofosfát prítomný v strednom Stuarte môže byť metabolizovaný niektorými koliformami, okrem iných gramne negatívnych baktérií, a preto sa vynásobí v tomto médiu.

Toto riziko sa zvyšuje, čím viac je spracovanie vzorky oneskorené. Podobne aj výstava média Stuart pri vysokých teplotách počas prenosu ovplyvňuje tento konkrétny vplyv.

Odkazy

1. „Stred dopravy (mikrobiológia).„ Wikipedia, encyklopédia zadarmo. 13. apríla 2018, 10:36 UTC. 1. apríla 2019. K dispozícii na: toto.Wikipedia.orgán
2. Microkit Laboratories: Kultúrne médiá. Prepravné médium Stuart. K dispozícii na: K dispozícii v: Culture Media.com
3. Lablisan. Prepravné médium Stuart. K dispozícii na: Lablinsan.Cl
4. Vedecký MDM. Výhody priemerného mikrobiologického transportu Stuart. K dispozícii na: mdmcientify.com
5. Metrix Laboratories. Štrbina. 2017. K dispozícii na: Metrixlab.mx
6. Forbes B, Sahm D, Weissfeld a. (2009). Mikrobiologická diagnostika Bailey a Scott. 12 ed. PAN -AMERICKÁ REDICIAL S.Do. Argentína.
7. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologická diagnostika. 5. vydanie. PAN -AMERICKÁ REDICIAL S.Do. Argentína.