Tripticaseína sójová vývar

On Sójový vývar Tripticenína Je to tekuté kultivačné médium, veľmi výživné a nie selektívne. Kvôli svojej veľkej všestrannosti je jedným z najbežnejšie používaných médií kvapaliny v mikrobiologickom laboratóriu.

Je tiež známy pod názvom Triptic Soy Soy Tryptický som Vývar alebo CST). Jeho použitia sú veľmi rozmanité kvôli ich zloženiu. Skladá sa z tripteínu, peptónu sójových bôbov, chloridu sodného, ​​dipotenzie a fosfátu glukózy.

Soy Soy Tripticaseína vysiate s kmeňom Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, kde sa pozoruje produkcia pigmentu. Zdroj: Fotografia, ktorú urobil autor MSC. Marielsa Gil.

Je schopný reprodukovať klinicky dôležité patogénne baktérie, vrátane tých, ktoré požadujú z výživového hľadiska a anaeróbnych baktérií. V tomto médiu sa môžu vyvinúť aj niektoré oportunistické a znečisťujúce huby.

Vďaka svojej vysokej výživovej energii má vysokú citlivosť na detekciu mikrobiálnej kontaminácie, z tohto dôvodu bola vybraná pomocou služby Inšpekcie zdravia zvierat a rastlín USDA pre mikrobiologickú analýzu vakcíny.

Podobne, sójový vývar Trittiaseína spĺňa požiadavky rôznych farmakopov (európsky EP, japonský JP a severoamerický USP) pre mikrobiologické štúdium výrobkov na priemyselnej úrovni, ako je kozmetika a potraviny.

Na druhej strane stojí za zmienku, že napriek veľkému využitiu je toto médium relatívne ekonomické, takže je cenovo dostupné pre väčšinu mikrobiologických laboratórií. Okrem toho je veľmi ľahké pripraviť sa.

Základ

Tripteín, peptón a glukóza poskytujú základné výživové vlastnosti, aby sa stal ideálnym médiom pre rýchly mikrobiálny vývoj.

Môže vám slúžiť: Linnean taxonómia živých bytostí

Približne 6 až 8 hodín inkubácie už môžete oceniť rast väčšiny mikroorganizmov. Existujú však kmene pomalého rastu, ktoré môžu trvať dni na rast.

Chlorid sodný a dipotáza fosfátu pôsobia ako osmotická a pH regulátorová rovnováha. Prítomnosť rastu dokazuje výskyt zákalu v strede; Ak neexistuje rast, médium zostáva priesvitné.

Kvôli svojej svetlej farbe je možné pozorovať výrobu pigmentov, ako je napríklad obraz, ktorý je zobrazený na obrázku na začiatku článku, ktorý zodpovedá pigmentu, ktorý produkoval pomocou Pseudomonas aeruginosa. 

Príprava

-Sójový vývar Tripticenína

Na prípravu vývaru Triptych Soy sa musí zvážiť 30 GR dehydratovaného komerčného média v digitálnej rovnováhe. Potom sa rozpustí v liter destilovanej vody obsiahnutej v fixole.

Zmes sa ponecháva v pokoji 5 minút a následne si vyžaduje zdroj tepla, aby pomohol strednému rozpusteniu. Musí sa to často rozrušiť, zatiaľ čo vriaci za 1 minútu.

Po rozpustení je podľa potreby distribuovaný v skúmavkách primeranej veľkosti. Môžete použiť trubice s vatovým uzáverom alebo baquelita tapas. Následne sa skúmavky sterilizujú v autokláve pri 121 ° C počas 15 minút.

Médiové pH musí byť 7,3 ± 0,2

Malo by sa brať do úvahy, že farba dehydratovanej kultúry je béžová čistá a mala by sa skladovať medzi 10 až 35 ° C na suchom mieste. Zatiaľ čo pripravený vývar je ľahký jantárová a musí sa skladovať v chladničke (2 až 8 ° C).

-Tripticaseína sójové varianty

Modifikovaný vývar sójovej sójovej trikseínu je možné pripraviť pridaním žlčových solí a novobiocín, aby sa tak stalo selektívnym pre izoláciu A. coli. Ďalšou možnosťou na rovnaký účel je pripraviť sójový sójový vývar doplnený vankomycínom, celomime a telurito (2,5 µg/ml).

Môže vám slúžiť: 25 príkladov asexuálnej reprodukcie

Na druhej strane, do vývaru Tritticaseína sójovej sójovej vývaru je možné pridať viac glukózy (0,25%), keď cieľom je stimulovať tvorbu biofilmov.

Využitie

Je dostatočne výživná na to, aby umožnila rast náročných alebo nepríjemných baktérií, ako je napríklad Pneumónia streptococcus, Streptococcus sp a brucella sp, Nie je potrebné dopĺňať krv alebo sérum.

Podobne sa v tomto vývaru môžu vyvíjať niektoré huby, napríklad Komplex Candida albicans, Aspergillus sp a Histoplazmatické kapsulatum.

Okrem toho je toto médium v ​​anaeróbnych podmienkach ideálne na obnovenie baktérií patriacich k pohlavia Clostridium, ako aj na anaeróbne baktérie, ktoré nie sú v rozpore s klinickým významom.

Ak sa pridá 6,5% chlorid sodný, môže sa použiť na rast enterococcus a ďalšie streptokoky skupiny D.

Na úrovni výskumu bola veľmi užitočná v rôznych protokoloch, najmä pri štúdiu biofilmov alebo biofilmov tvoriacich baktérie. Používa sa tiež na prípravu 0,5% bakteriálnej suspenzie MAC Farland, ktorá je potrebná na vykonanie antibiogramu metódou Kirby a Bauer.

V tomto prípade sa odoberú 3 až 5 kolónií podobného vzhľadu a emulguje sa v 4-5 ml sójovej SOA triptikázy. Potom sa inkubuje 2 až 6 hodín pri 35-37 ° C a následne sa hodí k požadovanej koncentrácii pomocou sterilného roztoku soľného roztoku. Tripticaseín Sójová prebudenie by sa nemala používať od 18 do 24 hodín inkubácie.

Vysiať

Vzorka môže byť zasiate priamo alebo čisté kolónie odobraté zo selektívnych prostriedkov môže byť predmetom. Inokulum musí byť malé, aby sa pred inkubáciou nezakladalo médium.

Normálne sa inkubuje pri 37 ° C v aerobióze počas 24 hodín, ale tieto podmienky sa môžu líšiť v závislosti od hľadaného mikroorganizmu. Môže sa tiež inkubovať v podmienkach anaerobiózy pri 37 ° C, ak je to potrebné. Napríklad pri náročných mikroorganizmoch alebo pomalom raste sa môže inkubovať až 7 dní.

Môže vám slúžiť: Dextrose Potato Agar: Nadácia, príprava a použitie

V mikrobiologickej analýze farmaceutických látok - ako vakcíny - protokoly sú prísnejšie. V týchto prípadoch nie je vývar bez rastu vylúčený, kým nestretne 14 dní nepretržitej inkubácie.

Qa

Z každej pripravenej šarže by sa malo inkubovať 1 alebo 2 trubice, aby sa preukázala jeho sterilita. Musí zostať bez zmeny.

Môžete tiež zasiať známe kmene, aby ste vyhodnotili svoje správanie. Medzi kmene, ktoré sa môžu použiť, patria:

Aspergillus brasiliensis ATCC 1604, Candida albicans ATCC 10231, Bacils subtilis ATCC 6633, Stafylococcus aureus ATCC 6538 alebo 25923, Escherichia coli ATCC 8739,  Pyogenes Streptococcus ATCC 19615, Pneumónia streptococcus ATCC 6305, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Salmonella typhimurium ATCC 14028.

Vo všetkých prípadoch musí byť rast uspokojivý za podmienok atmosféry a primeranú teplotu pre každý mikroorganizmus.

Obmedzenia

-Fermentácia glukózy spôsobuje zostup stredného pH produkciou kyseliny. To môže byť nepriaznivé pre prežitie mikroorganizmov citlivých na kyslosť.

-Neodporúča sa na udržiavanie kmeňov, pretože okrem kyslosti baktérie po niekoľkých dňoch výfukových živín s následnou akumuláciou toxických látok, ktoré vytvárajú nehostinné prostredie.

-Musíte sa starať o všetky protokoly sterility, pretože vývary sú ľahko kontamminovateľné.

-Po príprave sójových vývarov Triptiaseínu by sa nemalo snažiť preniesť vývar pre inú sterilnú trubicu, pretože tento typ manévrov je veľmi zraniteľný voči kontaminácii.

Odkazy

1. Británske laboratórium. Sójový vývar Tripteine. Dostupné na: BritánAlab.com
2. Laboratórium MCD. Sójový vývar Tripticenína. K dispozícii na: elektronické systémy.com
3. Laboratórium neogen.  Sójový vývar Triptych. K dispozícii na: Potravinová bezpečnosť.Neogén.com