Izolácia technických mikroorganizmov a význam

On Izolácia mikroorganizmov Znamená to súbor techník používaných na extrakciu a oddelenie druhov zaujímavých mikrób od ich prirodzeného biotopu po biotop In vitro. Tieto techniky sú súborom mnohých základných a potrebných nástrojov pre mikrobiologické štúdie.

Väčšina známych mikroorganizmov a ktoré boli definované vedou, sú tie, ktoré boli možné izolovať a udržiavať v nádobách, ktoré čiastočne simulujú vnútorné podmienky miest, kde žijú.

Typický obraz kolónií bakteriálneho mikroorganizmu izolovaných v pevnom médiu vo vnútri Petriho kapsuly (obrázok Nadya_il v www.Pixabay.com)

Asi jedným z prvých mužov, ktorý precvičil izoláciu mikroorganizmov.

Až v časoch vedcov Louis Pasteur a Robert Koch, v priebehu devätnásteho storočia, ktoré začali vykonávať prísne praktiky, ktoré slúžili na izoláciu špecifických mikroorganizmov, a to všetko s cieľom ich podrobne podrobne študovať.

Na rozdiel od Leeuwenhoeku sa títo vedci zamerali na izoláciu definovaných druhov iných druhov environmentálnych mikróbov. Okrem toho sa zaujímali o to, aby ich udržiavali nažive čo najdlhšie mimo ich prirodzeného prostredia.

V súčasnosti boli vyvinuté presné techniky na izoláciu a rast mnohých rôznych mikroorganizmov získaných takmer z akéhokoľvek prostredia na biosfére.

[TOC]

Techniky izolácie mikroorganizmov

Všetky izoláty mikroorganizmov začínajú zbierkou vzorky v prírode, kde sa nachádzajú mikroorganizmy, ktoré sú predmetom záujmu. Tieto miesta môžu byť zranené v zvieratách alebo zeleninových tkanivách, pôdach alebo substrátoch, kaluzach, moriach, povrchoch, ako je pokožka atď.

Vzorka je vyrobená dotykom alebo podporou kontajnera, ktorá má médium s požiadavkami vhodnými pre rast mikroorganizmov na povrchu, na ktorej sú požadované. V tomto kontajneri získate to, čo sa nazýva „kultivácia“ mikróbov.

Môže vám slúžiť: stentor

Vo všeobecnosti je prvá plodina získaná z prírodných biotopov nepochybne „zmiešaná kultúra“, to znamená, že sa skladá z veľkého počtu rôznych druhov mikróbov.

Väčšina druhov mikroorganizmov však môže byť v laboratóriu izolovaná a snaží sa získať kultúry mikroorganizmu, kde rastú iba druhy záujmu alebo, inými slovami, získava „čisté plodiny“.

Proces, ktorý sa vykonáva na získanie „čistých plodín“, je v podstate to, čo sa nazýva „izolácia mikroorganizmov“.

Existuje veľa techník na izoláciu mikroorganizmov a existujú dokonca aj niektoré konkrétne pre určitý typ mikroorganizmu. V iných prípadoch je možné získať čistú plodinu, ktorá zhromaždila iba vzorku prírodného prostredia.

Medzi najpoužívanejšie izolačné techniky na oddelenie druhu záujmu nájdeného v médiách so zmiešanou kultúrou sú:

Škrabance alebo pruhy

Možno je to najpoužívanejšia metóda na izoláciu mikroorganizmov. Táto technika má pripraviť sterilné tuhé médium so všetkými výživovými zlúčeninami potrebnými na rast mikroorganizmu v sklenenej nádobe, ako je Petriho kapsula.

Použitím jemného prístroja, ktorý je zvyčajne špicatý, sa dotýka mikroorganizmu, ktorý je požadovaným tanierom.

To sa robí intenzívne tam a späť cez povrch pevného alebo dohodnutého média, akoby to bol kľukatý. Zvyčajne sa to robí, kým nie je zakrytá viac alebo menej tretina priemeru agaru na doske.

Fúzia so stredným alebo podšívkou

Pre túto metódu sa vykonáva riedenie prostredia, kde sa mikróby zozbierané do bodu, kde je len niekoľko stoviek buniek pre každý mililiter média, kde sa zriedili.

Môže vám slúžiť: Aspergillus fumigatus

Z tohto riedenia sa odoberajú niektoré mililitre a zmiešané s médiom, ktoré sa pridá do nádoby skôr, ako upevní. Ako zmes medzi dohodnutým médiom a tekutým médiom, kde sú mikroorganizmy ponorené do stredu a sú viditeľné iba, až kým sa nezmenia vo forme kolónie.

Pri vývoji ako kolónie je ľahšie ich oddeliť od zvyšku mikroorganizmov iným metódam, napríklad škrabance, napríklad.

Sériové riedenie

Táto metóda spočíva v vykonávaní riedenia seriálov z média, kde sa nachádzajú mikroorganizmy. Príkladom sú riedenia, ktoré sa robia na očistenie Lactococcus lactis ani Lactobacillus acidophilus, baktérie zodpovedné za výrobu syra a jogurtu.

Približne 1 mililiter trubice obsahujúcej kyslé mlieko alebo predtým fermentovaný jogurt sa odoberie a tento mililiter sa naočkuje do sterilného mlieka bez mikroorganizmov. Následne približne mililiter uvedeného mlieka sa odoberie a proces sa opakuje.

Toto sa opakuje približne tri alebo štyri po sebe nasledujúce časy, čo je veľmi pravdepodobné, že sa dostane Lactococcus lactis ani Lactobacillus acidophilus v izolovanom médiu znečisťujúcich látok, ktoré môžu predstavovať ďalšie mikróby.

Podrobná fotografia miesta a typické materiály pre izolované mikroorganizmy (obrázok Sintija Valucka na www.Pixabay.com)

Postup obohatenia

Táto metodika sa dosahuje na rast mikroorganizmov v kultivačných médiách s podmienkami, ktoré stimulujú alebo uľahčujú rast druhov záujmu av mnohých prípadoch v podmienkach, ktoré inhibujú rast ďalších znečisťujúcich mikroorganizmov.

Baktérie žánru Salmonella Rastie v kultúrnych médiách so Selenitom, pretože tieto mikroorganizmy transformujú selenit na selén, aby ho mohli metabolizovať. Selenito v strede sťažuje asimiláciu živín pre ďalšie mikroorganizmy odlišné od Salmonellas.

Jedna alebo exkluzívna technika

Možno je to najťažšia a najmenej efektívna technika izolácie mikróbov. Znamená to umiestnenie kvapky média (vzorky), kde sú mikroorganizmy umiestnené v sterilnom kryte a potom sa umiestnia na mikroskopovú doštičku.

Môže vám slúžiť: auxotroph

Následne, keď sa pozoruje, je extrahovaná jedinou bunkou pomocou sterilnej mikro pipety. Kvapka sa umiestni do ďalších sterilných krytov, ktoré sa inkubujú pri vhodnej teplote pre mikroorganizmus. Nakoniec sa pod mikroskopom opäť pozoruje, aby sa ukázal rast.

Ak, keď sa nové bunky opäť vyvinuli z jednotlivých buniek, ktoré boli odobraté, sú pridané do sterilného kultivačného média, aby sa získala úplne izolovaná čistá plodina.

Personalizované techniky

Na planéte Zem sú nekonečné rôzne mikróby, ktoré sú rozptýlené takmer všetkými známymi ekosystémami. Niektoré mikroorganizmy sú známe ako extrémofily a potrebujú exkluzívne podmienky pre svoj rozvoj a rast.

Tieto extrémne podmienky sú výhodné a znevýhodnené pre izoláciu, pretože hoci umožňujú iba rast týchto mikroorganizmov, môže byť ťažké obnoviť ich obnoviť In vitro.

Dôležitosť

Izolácia mikroorganizmov predstavuje jeden z najdôležitejších pokrokov v oblasti vedy a medicíny. To umožnilo ľudstvu študovať a rozvíjať účinné liečby proti rôznym mikrobiálnym patogénom.

V súčasnosti je známe, že mikroorganizmy tvoria podstatnú súčasť všetkých ekosystémov, takže získanie izolácie niektorých z nich s relatívnym významom pre človeka umožňuje výskumníkom intenzívne ich študovať, aby podrobne pochopili svoju funkciu v každom ekosystémovom.

Odkazy

1. Z Kruif, P. (Devätnásť deväťdesiat šiestich). Lovci mikróbov. Houchton Mifflin Harcourt.
2. López, m. J., Nichols, n. N., Dien, b. Siež., Moreno, J., & Bothast, R. J. (2004). Izolácia mikroorganizmov na biologickú detoxikáciu lignocelulózových hydrolyzát. Aplikovaná mikrobiológia a biotechnológia, 64(1), 125-131.
3. Spigno, G., Tramelli, L., Galli, r., Pagella, c., & De Faveri, D. M. (2005). Biofiltrácia dichlórmetánových výparov: Izolácia mikroorganizmov.
4. Tresner, h. D., & Hayes, J. Do. (1970). Vylepšená metodika izolácie mikroorganizmov pôdy. Uplatňovať. Prostredie. Mikrobiol., 19(1), 186-187.
5. Willey, J. M., Sherwood, L., & Wouretton, C. J. (2009). Prescottove princípy mikrobiológie. Boston (MA): McGraw-Hill Higher Education.