TCBS Agar Čo je, nadácia, príprava, použitie

On Agar TCBS Je to vysoko selektívna a diferenciálna tuhá kultúra, ktorá sa používa na izoláciu a kultiváciu baktérií rodu Vibrio, najmä Vibrio cholerae, v. Vultnificus a Vložka. parahaemolyticus ako hlavné patogény tohto žánru.

Skratka TCB stredná priemerná citrát žlčovej žlčky tiosulfátu. Tento agar je tiež známy ako selektívne médium pre vibrácie. Pôvodný vzorec vytvoril Nakanishi a následne upravil Kobayashi.

Je zložený z kvasinkového extraktu, peptónu mäsa, tripteínu, citrátu sodného, ​​tiosíranu sodného, ​​oxového žlče, sacharózy, chloridu sodného, ​​železitého citranu, bromool modrej, tymolovej modrej a agary.

Toto zloženie umožňuje primeraný rozvoj druhov vibrácií zo vzoriek vody, potravín a výkalov; okrem Vibrio hollisae, To v tomto médiu nerastie. Okrem toho je médium TCBS schopné inhibovať rast iných sprievodných baktérií, najmä koliformných koliformných opatrení.

Kvôli závažným gastrointestinálnym a mimoriadne intestinálnym problémom, ktoré niektoré druhy rodu Vibrio spôsobujú, je ich diagnóza veľmi dôležitá. Človek je infikovaný hlavne konzumáciou surového alebo málo vareného jedla z mora alebo kontaminovaných vôd, ale aj infekciou rán.

Z tohto dôvodu musia klinické laboratóriá zahrnúť do agaru TCBS do štúdie kopolov vzoriek tekutej stolice, najmä s vzhľadom ryžovej vody. Najmä ak sa pacient odvoláva na to, že bol v kontakte s morskou vodou alebo konzumoval mäkkýše alebo ryby.

Základ

Extrakt z kvasiniek, Peptones mäsa a Tripteína je výživným zdrojom tohto média. TCBS agar je však nehostinným médiom pre väčšinu baktérií.

Jeho vysoká selektivita je daná agregátom citrátu sodného a žlčovej žlčky; Obidve sú inhibičné látky, ktoré tiež poskytujú alkalické pH médiu, obmedzujú rast sprievodnej flóry a uprednostňujú rast rastu Vložka. Cholerae, medzi inými druhmi. Predovšetkým Vibrio cholerae je veľmi citlivý na kyslosť.

Pokiaľ ide o chlorid sodný, vyrovnáva osmoticky vyváženia životného prostredia. Okrem toho, pretože jej koncentrácia je vysoká, pôsobí aj ako činidlo inhibítorov, čo uprednostňuje rast halofilových baktérií.

Tarks je fermentovateľný cukor, ktorý spolu s modrým -bromotimolovými modrými a modrými pH ukazuje. Z tohto dôvodu je s týmto médiom možné odlíšiť fermentačné kmene od nefermentu.

Kolónie fermentárnych kmeňov sacharózy sa vyvíjajú vo farbe a výrobou kyselín zmení médium zo zelenej na žltú farbu. Nefermentovanie priesvitných rastov rastie a stredné zvyšky pôvodnej farby (zelená).

Podobne toto médium obsahuje tiosulfát sodný ako zdroj síry a citrátu železitého ako odhaľujúce činidlo. Obidve vykazujú baktérie schopné produkovať sulfid vodíka (bezfarebný plyn). H₂S sa tvorí z tiosíranu a potom reaguje s citrátom železitým Viditeľnou čiernou zrazeninou sa vytvorí.

Nakoniec, agar je ten, ktorý poskytuje solídne konzistencie životnému prostrediu.

Príprava

Vážiť 89 g gr dehydratovaného média a rozpúšťajte sa v liter destilovanej vody. Pomáha rozpustenie pre časté zahrievanie a rozruch. Zmes sa môže variť až 2 minúty.

Toto médium nie je autoklava. Po jeho roztoku sa podáva priamo na sterilných platniach. Solidovaním sú objednané obráteným spôsobom v doštičkách a sú uložené v chladničke (2-8 ° C) až do použitia.

Médium po pripravenom musí byť pri pH 8,6 ± 0,2.

Farba dehydratovaného média je ľahká béžová alebo béžová zelená a farba média je zelený les alebo modrá zelená.

Pred zasiatím vzoriek je dôležité nechať doštičky temperovať.

Využitie

Najbežnejšou vzorkou pre vibrujúcu izoláciu sú hnačkové výkaly.

Vzorky stolice sa nedajú okamžite vysiať vo selektívnom prostredí, musia sa prepravovať uprostred Cary Blair.

Aby sa zvýšila citlivosť plodiny, výkaly môžu byť odovzdávané vodou Peptonada na pH 8,4 ako prostriedok na obohatenie maximálne 8 hodín, odtiaľ je subjektívne médiu TCBS.

Malo by sa tiež pamätať na to, že niektoré živé kmene môžu spôsobiť septikémiu u imunosupresovaných pacientov, preto môžu byť izolované z krvných kultúr. Podobne je možné analyzovať vzorky potravín a potravín z mora, keď dôjde k prepuknutiu epidémie choroby cholery.

Vysiať

Inokulum študovanej vzorky musí byť výrazný, osiava sa vykonáva metódou vyčerpania striha. Doštičky sa inkubujú pri 37 ° C počas 24 hodín pri aerobióze.

Predpokladané kolónie Vibrio cholerae Sú stredné, hladké, nepriehľadné, tenké a žlté okraje, pretože fermentujú sacharózu.

Podobne rastú z druhov z Vložka. Alginolyticus, Vložka. rieka, Vložka. Hareyi, v. Cincinnatiensis, v. Furnissii, v. Metschnikovii a nejaké Vložka. Vultnificus. Iné klinicky dôležité druhy, ako napríklad Vložka. parahaemolyticus Neprehývajú sacharózy, vyvíjajú sa ako kolónie olivových zelených.

Na druhej strane je potrebné pamätať na to, že niektoré kmene aeromónov a plesiomónov, ktoré sú oxidázou (+), môžu v tomto médiu rásť a vyvíjať žlté kolónie, ktoré môžu zamieňať klinického lekára. Zatiaľ čo niektoré kmene pseudomonas tiež oxidázy (+) rastú ako zelené kolónie, ako aj Vložka. parahaemolyticus.

Obmedzenie

Test oxidázy, ktorý je pozitívny na rod Vibrio. Zlúčeniny média v tomto teste silne interferujú. Preto sa musí robiť od subjektov v krvnom agar.

Qa

Dokázať, že médium je v dobrom stave, je to vhodné.

Na tento účel môžete použiť kmene:

-Vibrio cholerae - uspokojivý rast (žlté kolónie, priesvitný okraj).

-Vibrio parahaemolyticus - uspokojivý rast (kolónia so zeleným stredom a priesvitnou hranicou).

-Vibrio alginolyticus ATCC 17749 - Uspokojivý rast (žlté kolónie s halosom rovnakej farby okolo kolónie).

-Enterococcus faecalis ATCC 29212 - Celková alebo čiastočná inhibícia (malé žlté alebo priesvitné kolónie).

-Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853- Čiastočná alebo celková inhibícia (modré kolónie).

-Escherichia coli ATCC 25922 - úplne inhibované.

-Proteus mirabilis ATCC 43071 - Celková alebo čiastočná inhibícia. (Malé kolónie Zelený okraj priesvitný okraj).

Inkubácia média bez naočkovania by nemala mať zmenu.

Odkazy

1. BD laboratórium. Bd. Agar TCBS. K dispozícii na: BD.com
2. Británske laboratóriá. Stredné TCB. Dostupné na: BritánAlab.com