Vogel-Johnson Agar Čo je, nadácia, príprava, používa

On Agar Vogel-Johnson Je to pevná, selektívna a diferenciálna kultúra, špeciálne formulovaná na izoláciu Stafylococcus aureus. Toto médium vytvorili Vogel a Johnson v roku 1960 z modifikácie telurito glyciny agar sformulovaného v roku 1955 Zebovitz, Evans a Niven.

Modifikácia spočívala v zvýšení koncentrácie manitolu prítomného v prostredí a do začlenenia indikátora pH. Súčasný vzorec sa skladá z Tripteína, kvasinkového extraktu, manitolu, fosforečnanu dipotalizmu, chloridu lítium, glycín, fenol červená, agar, 1% roztok draselného teluritu.

Je potrebné poznamenať, že existujú aj iné médiá, ktoré, rovnako ako agar Vogel-Johnson, sú selektívne pre izoláciu Siež. aureus, ako je Salty Mannitol Agar a Baird Parker Agar. V tomto zmysle je možné povedať, že základ Vogel - Johnson súhlasí, že je zmes medzi slaným agarom Mannitol a Baird Parker Agar.

V prvých kolóniách Siež. aureus Rozlišujú sa fermentol. Na druhej strane, v druhej Siež. aureus Vyznačuje sa redukciou telura na teluro a vytvorením sivých kolónií na čiernu farbu. Obe vlastnosti sú pozorované vo Vogel-Johnson Agar.

Toto médium, rovnako ako jeho náprotivky, je užitočné na detekciu Stafylococcus aureus Vo vzorkách potravín, zdravotné kontroly priemyselných výrobkov a v klinických vzorkách.

Základ

Prínos živín

Médium Vogel - Johnson obsahuje extrakt z Triptein a kvasiniek; Obe látky poskytujú aminokyseliny s dlhým reťazcom, ktoré slúžia ako zdroje uhlíka a dusíka potrebné pre bakteriálny rast. Baktérie schopné pestovať v tomto médiu budú brať živiny týchto látok.

Selektívna sila

Vogel - Johnson Agar je schopný inhibovať rast gramne negatívnych baktérií a dokonca aj pozitívnych gramov, čo uprednostňuje vývoj pozitívnej koagulázovej stafylokoku. Inhibítorové látky sú telurit draslíka, chlorid lítium a glycín.

Diferenciálna sila

Látky, ktoré vytvárajú toto diferenciálne médium, sú manitol a draslík Tellurite. Manitol je uhľohydrát a keď sa vyrábajú fermentované kyseliny, ktoré vytvárajú médium od červenej po žltú, čo sa deje vďaka prítomnosti indikátora červeného pH pH pH.

Zatiaľ čo bezfarebný telurit, keď je redukovaný na kovový bezplatný teluro, má tmavo šedú farbu.

On Stafylococcus aureus fermenty manitolu a redukuje teluro na teluro. Preto typické kolónie Siež. aureus V tomto médiu sú sivé alebo čierne obklopené žltým médiom.

Baktérie, ktoré rastú v tomto médiu a neznižujú telurit alebo ferment Mannitol, budú tvoriť priehľadné kolónie obklopené červeným médiom, ešte intenzívnejšie ako pôvodná farba, kvôli alkalizácii média použitím peptones.

Na druhej strane, baktérie, ktoré znižujú telurit, ale nie fermente, bude manitol rásť, pretože sivé alebo čierne kolónie obklopené intenzívnym červeným médiom.

Ak sa médium pripravilo bez pridania draslíka teluritu, kolónie Siež. aureus Vyvinuli by sa ako žlté kolónie, obklopené žltým médiom, ako sa to deje v slanom agare manitol.

Osmotická rovnováha a činidlo Solidátor

Fosforečnan dipotalass udržiava osmotickú rovnováhu média a upravuje pH neutrality 7.2. Zatiaľ čo agar poskytuje solídne konzistentnosť kultivačnému médiu.

Príprava

1% P/V roztok draselného teluritu

Toto riešenie nie je zahrnuté v dehydratovanom prostredí, pretože v autokláve ho nemôže byť sterilizované. Z tohto dôvodu je pripravený od seba a pridaný do média už sterilizovaného.

Niektoré komerčné domy predávajú 1% roztok draselného teluritu pripravené na použitie. Ak sa chcete pripraviť v laboratóriu, postupujte takto:

Vážiť 1.0 gr z draslíka Tellurite a merajú 100 ml destilovanej vody. Rozpustite draselný telurit v časti vody a potom dokončite množstvo vody, až kým nedosiahne 100 ml. Sterilizovať roztok metódou filtrácie.

Vogel-Johnson Agar Base

Vážiť 60 g gr dehydratovaného média a rozpustite sa v 1 litri destilovanej vody. Zmes sa zahrieva na varenie, aby pomohla úplnému roztoku. Počas procesu rozpúšťania sa médium často miešajú.

Sterilizovať v autokláve 15 libier tlaku a 121 ° C počas 15 minút. Odstráňte z autoklávu a nechajte stáť, kým médium nedosiahne približnú teplotu 45 až 50 ° C. Pridajte 20 ml roztoku teluritu draselného predtým pripraveného na 1%.

Zmiešajte a nalejte na Petri sterilné taniere. Nechajte stuhnúť a objednávať v obrátenej doske.

Konečné pH pripraveného média musí byť na 7,2 ± 0,2.

Pred zasiahnutím vzorky musíte počkať, kým tanier vezme teplotu životného prostredia.

Farba pripraveného média je červená.

Využitie

Aj keď sa dá použiť na izoláciu Siež. aureus V akomkoľvek type vzoriek sa väčšinou používa na mikrobiologickú analýzu farmaceutických výrobkov, kozmetiky a potravín.

Odporúča sa, aby bol inokulu hustý. Siatie je možné vykonať škriavaním s platlinovou rukoväťou alebo povrchom s drigalski špachtľou.

Doštičky sa inkubujú pri 35-37 ° C počas 24 až 48 hodín pri aerobióze.

Qa

Ak chcete vykonať kontrolu kvality v prostredí Vogel-Johnson, môžete použiť ovládacie prvky nasledujúcich kmeňov:

Stafylococcus aureus ATCC 25923, Stafylococcus aureus ATCC 6538, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Escherichia coli ATCC 25922 o Proteus mirabilis ATCC 43071.

Očakávaný výsledok je nasledujúci: pre kmene Siež. aureus uspokojivý rast s čiernymi kolóniami obklopenými žltým médiom. Pre Siež. epidermidis Pravidelný rast s priesvitnými alebo čiernymi kolóniami obklopenými červeným médiom.

Tiež A. coli Očakáva sa, že dôjde k úplnej inhibícii a pre Proteus mirabilis čiastočná alebo celková inhibícia; Ak to rastie, urobí to sotva a kolónie budú čierne obklopené červenou polovicou farby.

Odkazy

1. BD Laboratories. VJ (Vogel a Johnson Agar). K dispozícii na: BD.com
2. Británske laboratóriá. Agar Vogel-Johnson. Dostupné na: BritánAlab.com