Vmajme

E -lungerangulárne škvrny. Coli na Agar Emb. Zdroj: Eunice Laurent, CC BY-SA 4.0, Wikimedia Commons

Čo je agar Emm?

On Vmajme Je to selektívne a diferenciálne tuhé kultivačné médium používané na izoláciu gram -negatívnych bacilov, hlavne rodiny Enterobacteriacee a ďalšie nezanedbávajúce gram -negatívne bacily. Je tiež známy s skratkou EAM, čo znamená eosina-azul metylénu.

Toto médium vytvorili Holt-Harris a Teague v roku 1916. Obsahuje peptón, laktózu, sacharózu, fosforečnan, agar, eozín, metylénku a voda. Je veľmi podobný agaru MacConkey, najmä ak sa používa Agar EMB od Levine, ktorý neobsahuje sacharózu.

V skutočnosti každé laboratórium rozhoduje, či funguje s jedným alebo druhým, pretože plní rovnakú funkciu, hoci biochemicky sa líšia.

Dokonca predstavuje rovnaké nepríjemnosti ako klasický agar MacConkey v produkcii spoločnosti Swarming pre pohlavie Proteus. Preto, aby sa zabránilo tomuto javu, koncentrácia agaru sa môže zvýšiť až o 5%.

Základ

Selektívny

EMP agar je jemne selektívny, pretože obsahuje anilinické (eozín a metylénovú modrú) sfarbenie, ktoré pôsobia ako inhibítory, ktoré bránia rastu väčšiny gramovo pozitívnych baktérií a niektorých náročných náročných baktérií.

Tento agar má však nepríjemnosti, že niektoré grampozitívne baktérie môžu odolávať prítomnosti inhibičných látok a rastú ako malé bezfarebné prepichnuté, ako napríklad Enterococcus faecalis a nejaké Stafylokok.

Niektoré kvasinky môžu tiež rásť, napríklad Komplex Candida albicans, ktoré poskytnú veľmi malé ružové kolónie. Camidospory sa môžu vyvinúť dokonca z týchto kvasiniek, ak je vzorka vysiate hĺbkou.

Diferenciálny

Na druhej strane, Agar EMP je tiež diferenciálnym médiom, pretože tieto farbivá (eozín a metylénová modrá) majú vlastnosť vytvorenia zrazeniny v kyslom pH, preto slúžia ako ukazovatele výroby toho istého.

Môže vám slúžiť: Allometria

Preto slabo kvasenie alebo sacharózové baktérie produkujú fialové farby za 24 až 48 hodín. Napríklad žánre Klebsiella, Enterobacter a Serratia.

Tie baktérie, ktoré silne fermentujú laktózu, ako napríklad Escherichia coli, alebo sacharóza ako Enterokolitická yersinia ani Proteus penneri, Tvoria zelenkavú čiernu zrazeninu, ktorá sa prejavuje v týchto druhoch charakteristický.

Je potrebné poznamenať, že ak sa používa médium EMB Levine (bez sacharózy), Enterokolitická yersinia a Proteus penneri Budú vyrábať priehľadné kolónie.

Baktérie, ktoré fermentujú laktózu alebo sacharózu, sa vyživujú prítomnosťou peptonov, ktoré poskytujú aminokyseliny a dusík potrebné na vývoj bakteriálnych a produkujú priehľadné kolónie. Napríklad žánre Salmonella a Shigella, medzi inými.

Je tiež dôležité zdôrazniť tento pohlavie Acinetobacter Môže prezentovať modré levanduľové kolónie, aj keď to nie je laktózový fermeter alebo sacharóza, ale majú vlastnosť fixovania metylénovej modrej na bunkovej stene. To sa môže stať aj pri iných oxidačných baktériách.

Príprava

Pôvodné dehydrované médium je ľahké béžové. Na prípravu tohto kultivačného média musí byť 36 gramov dehydratovaného média vážené a zavesené pri oprave, ktorá obsahuje liter destilovanej vody.

Po opustení zmesi 5 minút v pokoji vezmite fixola do zdroja tepla a intenzívnym a konštantným spôsobom miešajte, až kým sa úplne nevarí a úplne sa rozpustí.

Následne musí byť už rozpustené kultivačné médium sterilizované pomocou autoklávu pri 121 ° C počas 15 minút.

Čas dokončený, je odstránený z autoklávu a nechajte krátko stáť. Potom je stále horúca (45-50 ° C) medzi 15 až 20 ml agaru na každej petri sterilnej doske. Médium musí byť modrý lakmus.

Môže vám slúžiť: Amiláza: Charakteristiky, klasifikácia, štruktúra, funkcie

Po podávaní sa dosky ponechajú mierne odkryté, až kým sa agar trochu nevychladne. Potom sú zakryté a nechajú sa úplne upevniť. Následne sú objednané v obrátených doštičkách a sú uložené v chladničke (8 ° C) až do použitia.

Tento postup sa najlepšie vykonáva v laminárnom prietokovom zvonu alebo pred zapaľovačom Bunsen, aby sa zabránilo kontaminácii.

Je dôležité pamätať.

Konečné pH média musí byť 7.2 ± 0.2

Žiadosti

• Toto médium sa používa na zasievanie moču a výkalov alebo akéhokoľvek typu klinických vzoriek, najmä ak je podozrenie na prítomnosť nereagujúceho gram -negatívnych bacilov, ako sú bacily patriace rodine Enterobacteriaceae, ktorá v tomto strednom strednom priebehu veľmi dobre rastie.
• Enteropatogénne baktérie žánrov Shigella a Salmonella Rozlišujú sa ich bezfarebnými alebo mierne jantárovými kolóniami.
• Ostatné rastúce bacily, ktoré neferujú, ako napríklad Aeromonas, Pseudomonas, Acinetobacter, medzi inými.
• Toto médium je tiež veľmi užitočné pri mikrobiologickej analýze potravín a vody, pretože je ideálne pre úplnú fázu potvrdzovania stanovenia koliformov, tj na potvrdenie prítomnosti A. coli Z kalných vývarov EC, z najpravdepodobnejšej techniky čísla (NMP).

Qa

Na overenie, či novo pripravené kultúrne médium funguje dobre, je možné vysielať kontroly, aby sa pozorovali charakteristiky kolónií a overili, či dávajú podľa očakávania.

Na to môžete použiť kmene ATCC alebo dobre identifikované kmene A. coli, Enterobacter Aerogenes, Klebsiella sp, Salmonella typhimurium, Shigella Flexneri, Pseudomonas aeruginosa a niektoré gramovo pozitívne baktérie, napríklad Siež. aureus.

Očakáva sa, že A. coli generujte dobre vyvinuté modro čierne kolónie so zeleným kovovým leskom. Zatiaľ čo Enterobacter Aerogenes a Klebsiella sp Musia dať dobre rozvinuté slizničné kolónie Bluish Black.

Môže vám slúžiť: Stĺpec WinoGrasky

Na jeho časť, Salmonella Tyfimurium a Shigella Flexneri Musia vyvinúť veľké, bezfarebné kolónie alebo s ľahkou jantárovou farbou.

Nakoniec žáner Pseudomonas aeruginosa Rastie ako bezfarebné kolónie nepravidelnej veľkosti, zatiaľ čo grampozitívne baktérie by mali byť úplne inhibované alebo vyrastajú s veľmi malými kolóniami.

Konečné úvahy

Niekedy sterilizácia spôsobuje zníženie metylénovej modrej a pozorovanie pomarančového média. Aby sa metylénová modrá na oxid a obnovenie fialovej farby, musí sa jemne premiešať, kým sa farba nezotaví.

Po sterilizovaní sa farbivo môže zrážať, takže pred podávaním Petriho tanierov sa musí dobre premiešať.

Odkazy

1. Eosina a metylén Blue Agar. Zotavený z Calab.com.
2. Levine e.M.B. (S eosínou a metylénovou modrou). Zotavené z Británky.com.