Agar

Corynebacterium vrstvy na agar. Zdroj: Nathan Reading z Halesowen, Veľká Británia, CC od 2.0, Wikimedia Commons

Čo je vliehavý agar?

On Agar (Defektovanie cistine-laktózy-elektrón) je diferenciálna tuhá kultúra, ktorá sa používa na diagnostiku infekcií močových ciest. Zloženie kultivačného média je navrhnuté pre dobrý rast močových patogénov a je ideálne na kvantifikáciu jednotiek tvoriacich hrubého čreva (UFC).

Médium naliehaného kultivácie nie je selektívne, pretože v ňom môžu rásť gram -negatívne a gramovo pozitívne mikroorganizmy. To však nie je problém, pretože väčšina infekcií moču je spôsobená jediným typom mikroorganizmu.

V prípade polymikrobiálnych infekcií je možné dosiahnuť 2 alebo 3 rôzne baktérie, ale je to veľmi zriedkavé a väčšinou sú to kontaminované vzorky.

Medzi gramnegatívne baktérie, ktoré môžu v tomto médiu rásť, patria bacily patriace do rodiny Enterobacteriaceae a ďalšie enterické bacily, ktoré sú najčastejšie izolovanými uroopatogénmi vo vzorkách moču: Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, proteus mirabilis, Morganella Morganii, Pseudomonas aeruginosa, medzi inými.

Tiež medzi gramovo pozitívnymi baktériami, ktoré môžu v tomto médiu rásť Staphylococcus aureus, staphylococcus saprophytický, enterococcus faecalis, Streptococcus agalactiae, chorynebacterium sp, lactobacillus sp A môžu dokonca pestovať kvasinky, napríklad komplex Candida albicans.

V dôsledku chemického zloženia životného prostredia však neumožňuje rast niektorých náročných genitourinárnych patogénov, ako napríklad Neisseria gonorrhoeae, Gardnerella Vaginalis, medzi inými.

Nadácia agaru vliehavého

Kultúrne médium má ako zdroj energetického extraktu z mäsa, hydrolyzovaného kazeínu a hydrolyzovanej želatínovej hydrolyz. Poskytujú živiny pre vývoj málo náročných baktérií.

Obsahuje tiež cystín, aminokyselinu, ktorá umožňuje rast koliformných látok, ktoré je možné rozlíšiť svojou malú veľkosť.

Môže vám slúžiť: Virulenčné faktory

Obsahuje tiež ako fermentovateľnú uhľohydrátovú laktózu, takže toto médium je rozdielne a je schopné rozlíšiť fermentujúce baktérie laktózy, ktorá nie je preferovaním.

Fermentujúce baktérie premenia stredné pH produkciou kyseliny, vyvíjajú sa žlté kolónie, zatiaľ čo baktérie, ktoré nie sú preferované.

Fermentačná reakcia je odhalená vďaka prítomnosti indikátora pH, ktorý je v tomto médiu bromotimol modrý.

Na druhej strane nízka koncentrácia stredných elektrolytov inhibuje typický invazívny rast rodu Proteus, nazývaný rojový efekt. To vytvára výhodu vzhľadom na iné médiá, pretože umožňuje počítanie UFC, vrátane ak je prítomné pohlavie Proteus.

Nízka koncentrácia elektrolytov však inhibuje rast niektorých druhov rodu Shigella, Toto je nevýhoda, pokiaľ ide o iné médiá.

Nadácia Cled Agar (Bevis)

Existuje variant alebo modifikácia tohto média, ktorú vyrobil Bevis, ktorý začlenil pôvodnú kyselinu zloženie fuchsínu (Andrade). To isté pôsobí spolu s bromotimolovou modrou na rozlíšenie fermentujúcich baktérií od nefermentu.

Rozdiel medzi konvenčným a upraveným prostredím je farba, ktorú kolónie prijímajú. V prípade baktérií fermentujúce laktózu, kolónie získavajú červenkastú oranžovú farbu ružovým alebo červeným halo, zatiaľ čo nefermentovanie sú šedé.

Žiadosti

Používa sa priliehaný agar výlučne Pre vzorky vzoriek moču. Používanie tohto média je obzvlášť časté v európskych laboratóriách, zatiaľ čo v Amerike sa používa menej.

Môže vám slúžiť: Amensalizmus: charakteristiky, príklady, rozdiely s večerom

Zhromaždenie vzorky musí spĺňať určité parametre, aby sa získali spoľahlivé výsledky vrátane:

Pred odobratím vzorky neberú antibiotiká.

Prednostne vezmite moč prvej hodiny ráno, pretože je koncentrovanejší, keď nie je možné odobrať vzorku invazívnymi metódami.

Pred odobratím vzorky umyte genitálie dobre.

Zlikvidujte prvý prúd močenia a potom vložte nádobu.

Zhromaždite 25 až 30 ml moču v dobre označenej sterilnej nádobe.

Okamžite vezmite laboratórium obklopené na ľade.

Musí sa spracovať pred 2 hodinami vydania alebo chladeniu pri 4 ° C maximálne 24 hodín.

Vzorky moču

Vzorka moču musí byť zriedená 1:50.

Na riedenie, Colloqar 0,5 ml moču pacienta a zriedeného s 24,5 ml sterilného fyziologického roztoku. Zmerajte 0,1 ml zriedovaného moču a prasnicu povrchom s drigalski špachtľou na spletenom médiu.

Toto je uvedená metóda vysiate na počítanie kolónií. Preto sa používa vo vzorkách moču, pretože výsledky sa musia vyjadriť v UFC/ML.

Pre kvantifikáciu získaných kolónií postupujte takto: spočítajte kolónie doštičky a vynásobte 10 a potom 50. Toto je množstvo ufc/ml moču.

Interpretácia

Subjekty nad 100.000 UFC/ml -indika močová infekcia.

Stretnutie pod 1 000 UFC/ml- Neexistuje žiadna infekcia.

Medzi 1 000-10.000 ufc/ml -dudoso, možná kontaminácia, opakovaná vzorka.

Id

Gram by mal byť vyrobený do kolónií pestovaných v Cled.

Môže vám slúžiť: kataláza: Charakteristiky, štruktúra, funkcie, patológie

Napríklad, ak je to gram -negatívny bacil, bude zasiate na agar MacConkey, kde je fermentácia alebo nie laktóza potvrdená. Okrem toho je na vykonanie oxidázového testu pripojený výživný agar.

V prípade, že gram odhaľuje gramovo pozitívne kokosové orechy, môže byť predmetom slaného agaru manitol a výživného agaru. V poslednom menovanom teste sa vykonáva test katalázy. Nakoniec, ak sa pozorujú kvasinky, bude zasiate na agare Sabouraud.

Mnoho laboratórií ignoruje používanie stredne veľkého a uprednostňuje iba používanie krvi, macconkey a výživného agaru na výsev vzorkách moču.

Príprava

V felole s literou destilovanej vody sa rozpustite 36,2 g agaru vliehavého prášku. Po 5 minútach odpočinku zahrievajte resuspektovaný agar a neustále miešajte, až kým sa nevarí 1 minúta.

Potom sterilizujte pri 121 ° C počas 15 minút v autokláve. Dokončený čas, odstúpte od autoklávu a nechajte vychladnúť, až kým nedosiahne teplota 45 ° C. Následne sa podáva medzi 15-20 ml na každom sterilnom Petri.

Postup podávaný do tanierov sa musí vykonávať vo vnútri laminárneho prietokového zvončeka alebo pred zapaľovačom Bunsen, aby sa predišlo kontaminácii.

Podávané dosky sa môžu upevniť, objednávať v obrátenej forme a uložené v chladničke (2-8 ° C) až do použitia.

Konečné pH pripraveného média musí byť na 7,3 ± 0,2.

Odkazy

1. Odporúčania pre mikrobiologickú diagnostiku infekcie moču. Mazanie. Infekt. Zotavené z Scielo.orgán.
2. Napoly. Zotavené z Británky.com.