BHI Agar Čo je, nadácia, príprava, používa
- 4660
- 1123
- Denis Škriniar
On Agar BHI o Infúzia mozgu srdca. Je to médium výživnej tuhej kultúry. V španielčine ho označujeme ako infúzne agar srdca Cerebro. Je to ne -selektívne kultivačné médium, čo znamená, že je možné vyvinúť všetky druhy gramálnych a gramne negatívnych baktérií, ako aj niektoré droždie a vláknité huby.
Skladá sa z mozgovej infúzie a teľacieho srdca, peptického hydrolyzu zvierat.
Je potrebné poznamenať, že agar BHI je jedným z najčastejších kultúrnych médií v bakteriologických laboratóriách. Môže sa používať bez doplnkov ako primárne, subjektívne kolónie získané v iných selektívnych médiách alebo na udržiavanie kmeňov v laboratóriu.
Na druhej strane je to ideálny prostriedok na použitie ako základ pri príprave obohatených médií, ako je krvný agar a čokoládový agar. Oba ideály na izoláciu náročných mikroorganizmov z výživového hľadiska. Malo by sa však brať do úvahy, že obsahuje glukózu, nie je vhodný na pozorovanie vzorov hemolýzy.
Podobne sa môže agar BHI použiť na prípravu špeciálnych prostriedkov na izoláciu patogénnych mikroorganizmov zložitého rastu v bežných médiách vrátane: Hemophilus sp, Francisella tularensis, Corynebacterium Diphtheriae a HistoPlasma Capsulatum.
S antibiotickou prísadou sa agar BHI stáva selektívnym médiom pre plesňovú izoláciu.
Základ
Je to výživné kultivačné médium na izoláciu mierne náročných mikroorganizmov, ktoré je schopné zvýšiť jeho obohatenie pridaním krvi a iných výživných doplnkov.
Je to ne -selektívne kultivačné médium, preto umožňuje rast najpozitívnejších a najnegatívnych baktérií, ako aj niektoré huby. Môže sa však stať selektívnym s pridaním antibiotík.
Médium obsahuje infúziu mozgu a teľacieho srdca, hydrolyzované zvieracie tkanivo a hydrolyzované tkanivo pankreatického kazeínu; Všetky tieto zlúčeniny pôsobia ako zdroje vitamínov, aminokyselín, dusíka a uhlíka.
Môže vám slúžiť: Flora a fauna Entre Ríos: Reprezentatívne druhyGlukóza je sacharid, ktorý poskytuje energiu mikroorganizmom, keď ju fermentujú. Zatiaľ čo chlorid sodný a fosforečnan, ktorý sa udržiava na osmotickú rovnováhu, a poskytujú pH blízko neutrality. Nakoniec, agar poskytuje životnému prostrediu solídnu konzistentnosť.
Príprava
Vážiť 52 gramov dehydratovaného média a rozpúšťajte sa v liter destilovanej vody. Zmes si vezmite do zdroja tepla, až kým sa nevarí, čím sa počas procesu rozpustenia často miešal.
Môžete pripraviť kliny alebo agarové taniere BHI bez prísad.
Kliny
Pri príprave klinov podávajte prípravu, až kým nenaplnia polovicu každej trubice, prikryte a sterilizujú v autokláve pri 121 ° C počas 15 minút, keď idem do postele na základni, až kým sa neuhýbajú. Následne držte v chladničke až do použitia.
BHI kliny pre bakteroteca. Zdroj: Fotografia, ktorú urobil autor MSC. Marielsa Gil.Taniere
Rozpustená zmes je autoklava pri 121 ° C po dobu 15 minút, keď sa opúšťa, nech sa ochladí až 50 ° C a podáva sa 20 ml média v Petri sterilných platniach. Môžu sa upevniť, investovať a ukladať do chladničky, kým ich nepoužívajú. Nechajte dosky pred siatom užívať okolitú teplotu.
Médiové pH musí byť 7,4 ± 0,2.
Nepripravené médium je béžové a pripravené je ľahké jantárové.
Agar v krvi
Po sterilizácii média ochladte na približnú teplotu 45 až 50 ° C, v tom čase pridajte krv (50 ml), jemne premiešajte na homogenizáciu a podávajte 20 ml na každej Petri doske. Ak sa na tanieri vytvoria bubliny, ľahší plameň na bublinách, aby sa ich odstránil, by sa mal rýchlo prejsť.
Podobne je možné pripraviť špeciálne médiá pridaním zodpovedajúcich prísad, keď zmes dosiahne teplotu 45 až 50 ° C.
Môže vám slúžiť: fyzické schopnostiMédium je čerešňa červená.
Žiadosti
Používajte bez doplnkov
Agar BHI bez prísad je užitočný ako primárna kultivácia a zasievať čisté kmene mikroorganizmov málo alebo mierne náročné na jeho následnú identifikáciu.
Keďže ide o svetlo farebné médium, je ideálny na pozorovanie pigmentov a tiež tým, že neobsahuje interferenciálne látky, niektoré biochemické testy, ako je oxidáza a kataláza, alebo na montáž ďalších biochemických testov z kolónií z tohto agary.
Podobne je BHI agar široký.
Doštičky alebo kliny vysadené povrchom s bakteriálnymi kmeňmi sa inkubujú pri 37 ° C počas 24 až 48 hodín. Zatiaľ čo v hubách bude teplota a čas inkubácie závisieť od typu hľadaného húb.
Ako základný agar na prípravu iných médií
S touto základňou môžete pripraviť obohatené a selektívne médiá.
Obohatený
Jeho hlavnou funkciou je slúžiť ako základ pri príprave rutinnej krvi v mikrobiologických laboratóriách. Najmä základňa BHI vedie k izolácii kmeňov Streptococcus SP. Má však nepríjemnosti, že nie je primeraný na pozorovanie hemolýznych vzorcov obsahom glukózy.
Používa sa tiež pri príprave králikov alebo koní Hemophilus sp. Pre lepšie výsledky môžete pridať doplnok obohatenia (Isavalex).
Ak vzorky pochádzajú z respiračného traktu do agaru, môže sa pridať bacitrakín, aby sa inhibovala sprievodná flóra a zvýšila pravdepodobnosť zotavenia kmeňov kmeňov kmeňov Hemophilus sp.
Na druhej strane môžete pripraviť krv (jahňacie alebo ľudské) s Cistina Tellurito na izoláciu Corynebacterium záškrt. Podobne je užitočný na prípravu králičej krvi, s agregátom cistine a glukózy na izoláciu Francisella tularensis.
Siatie doštičiek s krvným agarom sa vykonáva vyčerpaním a inkubuje sa pri 35-37 ° C počas 24-48 hodín v mikroaerofílii (5-10% CO2).
Môže vám slúžiť: fylogenetický strom: typy a ich vlastnosti, príkladySelektívny
Toto médium s agregátom antibiotík môže nahradiť agar Sabouraud na izoláciu plesní.
Agar BHI kombinovaný s chloramfenikolom - gentamycínom alebo penicilínom -, streptomycínom a konskou krv je ideálny na izoláciu Histoplazmatické kapsulatum.
V závislosti od mikroorganizmu, ktorý sa snaží izolovať inkubáciu pri 35-37 ° C alebo pri teplote miestnosti pri aerobióze. Niekedy je potrebná inkubácia v oboch teplotných rozsahoch pomocou 2 doštičiek.
Niektoré huby majú radi Trichophyton mentagrofyty Musia byť inkubované pri izbovej teplote až 7 dní.
Qa
Z každého pripraveného pozemku sa odporúča inkubovať 1 doštičku alebo klin pri 37 ° C počas 24 hodín a overiť, či nedochádza k rastu; Najmä je to dôležité pri príprave krvi, pretože je to ľahko kontamminovateľné médium.
Na druhej strane, kvalitu média je možné vyhodnotiť naočkovanie známych alebo certifikovaných vzorov kmeňov a pozorovanie jeho vývoja.
V tomto zmysle na vyhodnotenie agaru BHI bez prísad môžete použiť kmene Escherichia coli ATCC 25922, Stafylococcus aureus ATCC 25923 o Candida albicans ATCC 10231. 37 ° C sa inkubuje pri aerobióze 24 až 48 hodín. Vo všetkých prípadoch sa očakáva uspokojivý rast.
Na vyhodnotenie dosiek s krvným agarom môžete zasiať kmene Pyogenes Streptococcus ATCC 19615, Pneumónia streptococcus ATCC 6305 alebo Trichophyton mentagrophytes ATCC 9533.
Bakteriálne kmene sa inkubujú pri 37 ° C v mikroaerofílii počas 24 hodín, zatiaľ čo huba inkubuje pri teplote miestnosti vo vlhkej komore až do 7 dní. Vo všetkých prípadoch sa očakáva uspokojivý rast.
Odkazy
- Británske laboratóriá. Infúzia v mozgu agar. Dostupné na: BritánAlab.com.
- BD Laboratories. Infúzia mozgu (BHI) agar. K dispozícii na: BD.com.