Jednoduché zafarbenie

Čo je jednoduché zafarbenie?

Ten Jednoduché zafarbenie Je to rýchly a jednoduchý postup zafarbenia, v ktorom sa používa jedno farbivo, takže sa nazýva jednoduché. Používa sa hlavne na určenie morfológie a organizácie buniek prítomných vo vzorke.

Bunky prirodzene nemajú farbu, takže je potrebné nejakým spôsobom zviditeľniť, keď sú pozorované v mikroskope.

Je dôležité zdôrazniť, že farbivá používané pri jednoduchom farbení musia byť základné s pozitívnym zaťažením (katión), aby sa mohli spontánne spojiť so stenou a bunkovou cytoplazmou.

Tieto bunkové štruktúry sú negatívne nabité. Preto sa farbivo, pozitívne nabité, priťahuje bunky a spontánne sa k nim spája. Všetky bunky prítomné vo vzorke sú teda rýchlo zafarbené.

Sfarbenie farieb v jednoduchom zafarbení

V mikrobiologickom laboratóriu je možné použiť niekoľko základných farbív. Najpoužívanejšie sú:

• Metólska modrá.
• Krištáľový fial.
• Malachitový zelený.
• Základný fuchsin.

Všetky tieto farbivá fungujú dobre v baktériách, pretože majú farebné ióny (chromofory) s pozitívnou záťažou (katión).

Čas farbenia pre väčšinu farbív sú relatívne krátke. Všeobecne sa pohybujú od 30 sekúnd do 2 minút, v závislosti od afinity farbiva.

Je dôležité mať na pamäti, že pred farbením vzorky jednoduchým zafarbením musí byť predĺžená a pripevnená k sklenenému listu (sklíčko). Rozšírená a pevná vzorka sa nazýva náter.

Postup

Krok 1

Položte sklíčko na sfarbenie a naneste požadované farbivo. Zanechať zodpovedajúci časový zákon.

Spravidla jednoduché zafarbenie trvá niekoľko sekúnd alebo pár minút, v závislosti od farby sfarbenia.

Pozorovanie

V tomto kroku je dôležité nepresahovať odporúčaný čas použitého farbiva, pretože kryštály by sa mohli tvoriť v hárku a vytvárať to, čo je známe ako „artefakty“, ktoré skresľujú morfológiu buniek.

Krok 2

Opatrne umyte náter posúvača destilovanou vodou z fľaše alebo vodou z vodovodu, ktorá tečie pomaly, až kým sa odtok nestane priehľadným. Všeobecne to trvá 5 až 10 sekúnd.

Pozorovanie

Nepoužívajte prúd vody priamo na zápach, aby ste zabránili sile rovnakého poškodenia.

Ak nedochádza k destilovanej vode, voda z vodovodu sa dá použiť bez problémov, pretože to nebude mať vplyv na výsledok zafarbenia.

Krok 3

Vysušte posúvač s absorpčnými papierovými utierkami v jednom zmysle a bez trenia. Uistite sa, že spodná časť snímky je čistá.

Krok 4

Sledujte náter zafarbené v mikroskope. Začnite s najvzdialenejšími cieľmi, aby ste správne lokalizovali oblasť, ktorú chcete podrobnejšie pozorovať. Zmeňte cieľ, aby ste sa dostali bližšie a viac k vzorke.

Pozorovanie

Na použitie cieľa s najväčším zvýšením (normálne 100x) ponorný olej sa musí použiť, pretože to pomáha lepšie preniknúť a že obrázok vyzerá jasnejšie. Nie je potrebné používať kryt.

Krok 5

Nakoniec zlikvidujte všetky vzorky v príslušnom nádobe, ktorý je riadne označený ako „biologické riziko“.

Žiadosti

• Pozorovanie morfológie buniek.
• Pozorovanie vzoriek v chemických laboratóriách, na stanovenie prítomnosti baktérií, vírusov atď.
• Identifikovať infekčné agenti a správne diagnostikovať.
• Ako nevyhnutný nástroj v mikrobiológii.
• Vedieť, či baktéria má kapsulu alebo nie, a viem, ku čomu patrí.

Odkazy

1. Mikrobiologické aplikácie: laboratórna príručka vo všeobecnej mikrobiológii. Spoločnosti McGraw-Hill.
2. Harisha, s. Úvod do praktickej biotechnológie. Firewall.