Výživový agar

Výživový agar
Bakteriálne trenie s E. Výživný agar coli. Zdroj: Martin Priestley, CC BY-SA 4.0, Wikimedia Commons

Čo je výživný agar?

On výživový agar Je to ne -selektívne a nevýrazné tuhé kultivačné médium. V tomto prostredí rastú z výživového hľadiska všetky druhy neohrozených baktérií.

Je to jednoduchý prostriedok a napriek svojmu názvu obsahuje nižšiu výživu.

Jeho užitočnosť v laboratóriu je veľmi rozmanitá. Hlavne slúži na subkultiváciu druhov, udržiavanie kmeňov, počítanie kolónií, ako základ na prípravu krvi, okrem iného.

Vďaka svojej ľahkej béžovej farbe je výroba pigmentov generovaných niektorými bakteriálnymi kmeňmi, ako je zelenkavý pigment Pseudomonas aeruginosa, Tehlový červený pigment, ktorý vyrobil Serratia Marcescens Pri izbovej teplote zlatý žltý pigment Stafylococcus aureus, medzi inými.

Okrem toho je to jedno z najúspornejších kultúrnych médií na trhu.

Základ

Ako je uvedené vyššie, je to veľmi jednoduchý prostriedok, ktorý je založený na poskytovaní výživových látok pre bakteriálny rast bez obmedzenia a bez zložitých reakcií na interpretáciu.

Pretože médium je priesvitné, je ideálne počítať kolónie hĺbkou vysadenou metódou.

Kompozícia

Je zložený hlavne z extraktu z mäsa alebo kvasiniek, peptonov alebo pankreatickej želatíny, agar-graugar, chloridu sodného a destilovanej vody.

Extrakt z mäsa alebo kvasiniek a peptónov predstavuje zdroje uhlíka a esenciálnych minerálov (dusík, fosfor a síra), ktoré budú baktérie používať ako zdroj energie a rastových faktorov.

Podobne je agar -agar základom všetkých médií v tuhej kultúre, ktorý nahradí želatínu, ktorá bola prvou základnou zlúčeninou, ktorú používal Robert Koch na dodanie jej médií solídnu konzistenciu.

Môže vám slúžiť: Flora a fauna na Falklandských ostrovoch: Vynikajúci druh

Agar je polysacharid zložený z galaktózy, galaktomanano, agarózy a agarpektínu. KUMAGE pri 40 ° C a topí sa blízko 100 ° C.

Chlorid sodný poskytuje životné prostredie potrebné na bakteriálny vývoj.

Nakoniec voda slúži na hydratáciu a rozpustenie lyofilizovaných zlúčenín. Mala by sa použiť destilovaná voda upravená na neutrálne pH. Aktuálna voda by sa nemala používať, pretože obsahuje vápnik a horčík, ktoré môžu reagovať s fosfátmi prostredia a tvoria nerozpustné solí.

Príprava

Pre liter výživného agaru musíte zvážiť 31 g gr dehydratovaného média. Je umiestnený v fixole a rozpúšťa sa v liter destilovanej vody. Po 5 minútach odpočinku zohrejte na zdroj tepla a miešajte neustále, až kým sa nevarí 1 alebo 2 minúty.

Potom sa fixola umiestni do autoklávu a sterilizuje sa pri 121 ° C počas 20 minút. Vyvrcholil čas, odstraňuje sa z autoklávu a podáva sa v sterilnom Petri.

Ak sú Petriho dosky jednorazové (plastové), médium sa musí distribuovať, keď má agar približnú teplotu 50 ° C, aby sa zabránilo deformovaniu nadmerného tepla.

Nechajte stuhnúť a uložiť na obrátenom držiaku a chladte v chladničke pri 2 až 8 ° C, až kým nepoužívate.

Doštičky sa musia pred vysadením zmierniť. Ak sú kontaminované alebo dehydratované, nemali by sa používať výživné agarové platne.

Pripravené médium pH musí byť upravené na 7,3 ± 0,2.

Žiadosti

Je to najjednoduchšie kultivačné médium používané v mikrobiologickom laboratóriu. Jeho formulácia je vynikajúca pre rast neohrozených baktérií.

Jeho hlavné použitia sú nasledujúce:

  • Ako základ pre prípravu krvného agaru: Niekedy sa používa ako základ na prípravu krvi, nie je to však najbežnejšie používaná základňa.
  • Stimulovať sporuláciu baktérií tvoriacich spóry: Je obzvlášť užitočné stimulovať sporuláciu baktérií tvoriacich spór, napríklad ako napríklad Bacillus SP. Z tohto dôvodu je zasiatý kmeň žánru Bacil a inkubuje 24 hodín pri 37 ° C pri aerobióze. Akonáhle sa kolónie pestujú, doštička je vystavená teplotnému napätiu, to znamená, že teplota sporáka pri 44 ° C sa zvýši a ponechá sa o 24 hodín viac alebo sa zavedie do chladničky na 24 hodín. Na konci času sa rozširujú z úrody a farbenia gramom alebo farbením spór Shaeffer-Fulton. Budú pozorovať bacily s endosporami (spóry vo vnútri Bacillus) a exospore (spóry mimo bacilu).
  • Údržba kmeňov: Niektoré laboratóriá na podporu výskumu alebo podpory fakulty vyžadujú životaschopné baktérie s klinickým významom tak dlho, ako je to možné, s cieľom použiť banku baktérií (bakteroteca) na výskumné práce alebo na prípravu výučbových postupov, kde sa študenti naučia manipulovať a identifikovať ich a identifikovať ich mikroorganizmy. Na tento účel sa môžu použiť výživný agar, ako aj infúzia srdca cerebro. Agar sa pripravuje, nalial sa do skúmaviek s baqueliteským vekom a opiera sa o základňu, takže agar tužije a vytvára taco na dno a rám na povrchu (vrchol flauty). Každá trubica je označená umiestnením názvu baktérií, ktoré budú zasiate, a dátumom. Každá z baktérií bude zasiate na ráme a bude inkubovaná po dobu 24 hodín, akonáhle rastú kolónie. Potrubia sa ukladajú pri izbovej teplote. Bakterooteca sa musí obnoviť od 1 do 3 mesiacov, aby sa predišlo kontaminácii a dehydratácii životného prostredia, ako aj smrti baktérií. Týmto spôsobom je možné udržiavať iba neohrozené baktérie.
  • Kolónie: Aj keď existujú špecializované prostriedky na počet kolónií, napríklad štandardný počet, výživný agar sa môže použiť na tento účel, buď povrchom vysiate drigalski špachtľou alebo hĺbkou. Preto je veľmi užitočný pri mikrobiologickej analýze potravín a vody.
  • Vykonávanie diagnostických testov: Pretože je to prostriedok, ktorý neobsahuje krv ani žiadnu inú prísadu, je ideálny na užívanie kolónií pestovaných v tomto médiu na vykonanie katalázového testu. Tiež kvôli svojej svetlej farbe je indikované na testy oxidázy priamo na ploche vysiateho rozsahu, bez rušenia.
  • Rekreačná voda mezofilná aeróbna regenerácia (pláže): Výživový agar pripravený s 10% morskou vodou je užitočný na vyhodnotenie mezofilných aeróbov v plážových vodách. Týmto spôsobom môžete vidieť úroveň skutočného znečistenia, ktoré majú voda s týmito mikroorganizmami, pretože v tomto type vzoriek sa výsledky prekrývajú, keď sa používajú médiá pripravené konvenčným spôsobom. Je to vysvetliteľné z dôvodu náhlej zmeny, ktorú trpeli baktériami pri prechode z hypersalizovaného prostredia do prostredia s nízkou soľou, a preto mikroorganizmy vstupujú do stavu letargie, v ktorej sú životaschopné, ale nie kultivovateľné.
Môže vám slúžiť: samostatne

Odkazy

  1. Forbes, b., SAHM, D., Weissfeld, a. Mikrobiologická diagnostika Bailey a Scott. PAN -AMERICKÁ REDICIAL S.Do.
  2. Koneman, e., Allen, s., Janda, w., Schreckenberger, P., Winn, w. Mikrobiologická diagnostika. PAN -AMERICKÁ REDICIAL S.Do.