Biggy agar, príprava a použitia

On Agar Je to solídne, selektívne a diferenciálne kultúrne médiá. Bol navrhnutý tak, aby izoloval a pomohol identifikácii hlavných druhov Candida. Jeho meno Biggy pochádza z skratky v anglickej bizmut glukóze glycine yeas.

Pôvodný vzorec bol vytvorený Nickersonom, takže toto médium je známe aj ako Nickerson Agar. V súčasnosti sa skladá z kvasinkového extraktu, glycínu, dextrózy, citrátu amónneho, bizmutu citranu, síranu sodného a agaru.

Grafické znázornenie biggy agar. Zdroj: Flickr.com

Biggy Agar je formulovaný pre diferenciáciu komplexných druhov C. Albicans, c. Tropicalis, c. Krusei a C. Kefyr, Ale iné druhy ako napríklad Candida Glabrata, C. parapsilóza, c. Guilliermondii, Trichhosporun SP, Geotrichum Candidum a sacharomyces cerevisiae.

Má však dobrú citlivosť a špecifickosť, keď ju porovnáva s inými médiami s podobnou funkciou, je to na druhom mieste, ktorý je prekonaný Chromagarom. Z tohto dôvodu mnohé laboratóriá uprednostňujú druhé, aj keď je to oveľa drahšie.

Malo by byť zrejmé, že používanie biggy agaru, ako aj ďalšie podobné prostriedky, pomáhajú rýchlej predpokladanej identifikácii, ale nikdy potvrdzujúce. Preto musia byť k dispozícii ďalšie metódy identifikácie; Napríklad identifikačné systémy Vitek 32 a API 20.

[TOC]

Základ

Biggy agar sa považuje za čiastočne selektívne médium na izoláciu kvasiniek, najmä z rodu Candida, hoci iné žánre môžu rásť.

Je to tiež diferenciálne médium, pretože v závislosti od príslušných druhov sa v aspektoch, farbe, tvaru a veľkosti pozorujú rôzne charakteristiky. Považuje sa za chromogénne médium pre vývoj rôznych farieb v kolóniách.

Môže vám slúžiť: Metionine: Charakteristiky, funkcie, jedlo, výhody

Farba prezentovaná kolóniami kvasiniek je spôsobená prítomnosťou sulfitu bizmutu v agari. Nickerson si uvedomil, že kvasinky rodu sú úprimné. To vedie k kolóniám medzi svetlom a čiernou farbou.

Tento agar obsahuje extrakt z kvasiniek a dextrózy, ktorý poskytuje zdroj základných živín a energie na vývoj kvasiniek. Glycín je stimulujúci rast kvasiniek, pričom inhibuje vývoj určitých baktérií.

V tom istom zmysle pôsobia ako inhibítory bakteriálneho rastu amónny a bizmut citrát, ako aj sulfit sodný, inhibítory bakteriálneho rastu. Agar je agent, ktorý dáva životnému prostrediu solídnu konzistentnosť.

Príprava

Vážiť 45 g dehydratovanej kultúry a rozpúšťajte sa v liter destilovanej vody. Potrepte a zahrievajte zmes a nechajte variť 1 minútu k úplnému roztoku. Toto kultivačné médium nie je v autokláve sterilizované.

Pri ochladení približne 45 ° C v Maria nalejte 20 ml na petri sterilné taniere.

Farba dehydratovaného média je žltkasto a pripravená sivá je žltkastý biely gél, v ktorom je možné pozorovať miernu flokulačnú zrážku.

PH musí byť 6,8 ± 0,2.

Pripravené médium sa musí skladovať v chladničke (4 ° C) a chrániť pred svetlom. Ako je to prostriedok, ktorý by sa nemal používať čo najskôr. Jeho použitie sa odporúča skôr, ako sa stretne 3 dni od jeho prípravy.

Môže vám slúžiť: biomateriály

Využitie

Doštičky sa inkubujú pri teplote miestnosti (25 ° C) o 24, 48 a 72 hodín, inkubačný čas sa môže predĺžiť na 5 dní.

Každý druh Candidy vyvíja určité vlastnosti, vďaka ktorým sa navzájom rozlišujú. Výrobcovia média opisujú nasledujúce vlastnosti pre každý druh:

-Komplex Candida albicans: V tomto agari sa vyvíja ako hladké, okrúhle, hnedé alebo čierne kolónie, s miernou myceliálnou hranicou. S výhradou, že tmavá farba sa nerozširuje do prostredia.

-Candida tropicalis: Jasné, malé, tmavé svetlé kolónie, s čiernou a svetlou myceliálnou hranicou. Tmavá farba sa šíri smerom k životnému prostrediu, ktorá je typická pre tento druh po inkubovaní po dobu 72 hodín.

-Candida Krusei Vyvíjajte drsné, ploché kolónie, s okrajom medzi hnedou až Negruzco.

-Candida Parakrusei: stredne veľké kolónie, väčšinou s drsným vzhľadom, ploché. Farba sa môže líšiť medzi jasne tmavočarvicovou kávou na svetlú červenkastú kávu. Okraj kolónií má rozsiahle, žltkasté mycélium.

-Kandida stellelatoid: Vyvíjajte stredné, ploché kolónie, tmavo hnedá, takmer čierna. Myceliálny vývoj je veľmi vzácny.

Štúdia Yücesoy a Marol v roku 2003 ukázala, že chromagarové médium predstavuje lepšiu citlivosť a špecifickosť pre diferenciáciu a identifikáciu rôznych druhov Candida ako Biggy Agar.

Qa

Pokiaľ ide o kontrolu sterility, doštičky sa inkubujú bez naočkovania pri 25 ° C, v tme 24 až 48 hodín.

Môže vám slúžiť: Zmysel pre dotyk: časti, ako to funguje a funguje

Odporúčané kmene ATCC na vykonanie kontroly strednej kvality sú:

Komplex Candida albicans  ATCC 60193, Candida glabrata ATCC 2001, Candida Krusei ATCC 34135. Vo všetkých z nich sa očakáva, ako je opísané vyššie.

Môžete tiež použiť nasledujúce kmene:

Escherichia coli ATCC 25922, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 a Staphylococcus epidermidis ATCC 12228. V prvých dvoch sa očakáva celková inhibícia, ale v prípade čiastočného pestovania kolónií bude krémová farba.

V prípade Siež. aureus Očakáva sa, že bude úplne inhibovaná, ale ak čiastočne rastú, ich kolónie sú biele.

Obmedzenia

Niektoré baktérie sú schopné vyvíjať sa v tomto médiu a môžu dokonca stmaviť, simulovať suseda Candida.

Tabuľka: Charakteristiky kolónií niektorých kvasiniek v Biggy súhlasili podľa práce Yücesoy M a Marol S.

Zdroj: Yücesoy M, Marol S. Výkon Chromagar Candida a Biggy Agar na identifikáciu druhov YEAS. Ann Clin Antimikrob Microbiol. 2003; 2 (8): 1-7

Odkazy

1. Yücesoy M, Marol S. Výkon Chromagar Candida a Biggy Agar na identifikáciu druhov YEAS. Ann Clin Antimikrob Microbiol. 2003; 2 (8): 1-7.
2. Laboratórium MCD. Technický súbor veľkých starnutí. K dispozícii na: McDLab.pet/
3. Laboratórny neogén. Agar. K dispozícii na: Potravinová bezpečnosť.Neogén.com
4. Laboratóriá Conda pronadisa. Agar. K dispozícii na: Condalab.com
5. BD Laboratories. BD Biggy Agar (bizmut glukóza glycín Yaest Agar). 2011. K dispozícii na: BD.com