Charakteristiky safranínu, použitie, techniky, toxicita

Ten Safranín Je to meriquinoidné farbivo, pomenované za vlastníctvo vo svojej chemickej štruktúre 2 benzénových krúžkov a 2 chinoidných krúžkov, ktoré sú tie, ktoré poskytujú červenú farbu.

Vo svojej súhrnnej podobe sa tiež nazýva safranín alebo základný červený dimetyl, pretože jeho vedecký názov je 3,7-Diamino-2,8-dimetyl-5-fenyl-fenyl-fenyll_dvadsaťH₁₉N₄ Cl.

Chemická štruktúra safranínu naznačujúca benzén a chinoidné krúžky/ vodný roztok safranínu. Zdroj: Neurotoger [Public Domain] Editoval spoločnosťou MSC. Marielsa Gil/Lhchem [CC BY-SA 3.0 (https: // creativeCommons.Org/licencie/By-SA/3.0)]

Existuje variant nazývaný trimetyle-safrany, ale medzi oboma látkami nie je významný rozdiel.

Safranine je monochromatické farbivo a podľa charakteristík chemického vzorca je to kladná látka náboja. Preto má afinitu s negatívne zaťaženými štruktúrami. Tieto štruktúry budú zafarbené červené.

Táto vlastnosť poskytuje uplatniteľnosť v mnohých histologických technikách na farbenie rôznych bunkových štruktúr, a to z eukaryotických aj prokaryotických organizmov.

Safranine sa používa ako kontrastné farbivo v dôležitých a dobre známych technikách rutinného používania v bakteriológii. Tieto techniky sú: farbenie Gram-Hucker, Schaeffer Fulton farbenie na spóry alebo farbenie bakteriálnych kapsúl, okrem iného.

[TOC]

Charakteristika

Farba šafranu (korenie získané zo stigiem kvetu Crocus sativ) bola inšpiráciou umiestniť názov tohto farbiva. Z pojmu Saffron prichádza názov Safranine. Je to kvôli veľkej podobnosti medzi farbou šafranu a sfarbením, ktoré toto farbivo poskytuje.

Safranine sa dosahuje ako kryštály alebo prášok, pričom obe prezentácie sú rozpustné vo vode. Farbivo Safranine nemá zápach. Škvrna. Štruktúry, ktoré priťahujú farbivo safranínu, sa nazývajú safranofily.

Štrukturálne je safranín komplexný, má dva benzénové krúžky na konce a v strede sa nachádzajú dva chinoidné krúžky, kde sa nachádza katión N⁺. Stred štruktúry je systém zodpovedný za poskytovanie farby. Podľa tejto charakteristiky je toto farbivo klasifikované do kategórie II.

Využitie

Safranine sa používa na farbenie rôznych štruktúr. Obzvlášť zdôrazňuje Kulchitskyho bunky prítomné v gastrointestinálnom trakte, tiež nazývané enterokromofíny buniek.

Je schopný zafarbiť mikroorganizmy patriace rodine Rickettsiaceae. Podobne sa používa v rôznych technikách, ako je napríklad Kosterova metóda, modifikovaná metóda používaná na farbenie rodových baktérií Brucella.

Na druhej strane sa Safranine používa v technike farbenia Schaeffer Fulton Spory a vo farbení Gram-Hucker. V obidvoch technikách safranín funguje ako kontrastné farbivo.

Môže vám slúžiť: Ind

V prvom spóroch berú farbu zelenej malachitu a zvyšok štruktúr je červená podľa safranine. V druhom, gramne negatívne baktérie strácajú farbu fialového skla v kroku sfarbenia, preto safranín je ten, kto zafarbuje gramne negatívne baktérie červenej.

Ďalej sa safranín používa v bakteriológii na prípravu brucelky agar s riedením safranínu 1: 5000. Toto médium slúži na rozlíšenie tohto druhu Brucella suis zvyšok druhu. Brucella melitensis a Brucella prerušenie rast v tomto médiu, ale B. sušina Je to inhibované.

V agroindustriálnom poli sa safranín použil pri 2,25% a zriedený 1:10 na farbenie vzoriek stoniek z rastliny cukrovej trstiny.

Táto rastlina je bežne ovplyvnená baktériami Leifsonia xyli Poddajný. Xyli, ktorý poškodzuje Xilema rastliny. Vyhodnocujú sa zafarbené stonky, aby sa stanovila funkcia xylemových ciev.

Techniky v oblasti bakteriológie

Castañeda Farbining for r škvrnyBreh

Krv alebo tkanivové náter sa vloží do roztoku pufra (tlmenie fosfátu pH 7,6). Nechá sa spontánne vysušiť a potom sa pokryje metylénovou modrou po dobu 3 minút a sťahuje sa s safranínom. Rickettsias farebná modrá, kontrastujúca s červeným pozadím.

Upravené farbenie Koster pre Brucella

Vykonáva sa náter a Flamea v zapaľovači na fixáciu. Následne je pokrytá zmesou 2 častí nasýteného vodného safranínu s 3 časťami roztoku 1 mol/l, počas 1 minúty. Uskutočňuje sa umývanie destilovanou vodou a 1% fenado metylénovou modrou.

Ak vzorka obsahuje rodové baktérie Brucella Tieto budú pozorované oranžové v modrom pozadí.

Zafarbenie baktérií

Vykonáva sa zmes bakteriálnej suspenzie s čínskym atramentom a pridá sa safranín. Na mikroskope okolo každej bakteriálnej kapsuly s čiernym pozadím bude pozorovaný červenkastý halo.

Môže vám slúžiť: čisté látky

Farbenie spór Schaeffer Fulton

Vykonáva sa rozšírená bakteriálna suspenzia. Potom je pevné na teplo. Je pokrytý 5%malachitovou zelenou farbou, často plameňom až do emisie výparov. Proces sa opakuje 6-10 minút. Nakoniec sa premyje vodou a prenajíma sa 0,5% safranínu po dobu 30 sekúnd. Bacily sú zafarbené červené a zelené spóry.

Zafarbenie

Vykonáva sa predĺžená s bakteriálnou suspenziou a fixuje sa na zahrievanie. Lamina s fialovým sklom je pokrytá 1 minúta. Potom je Lugol umiestnený ako mordant roztok za 1 minútu. Následne sa sfarbuje s acetónovým alkoholom a nakoniec si najaje Safranine po dobu 30 sekúnd.

Gram pozitívne baktérie sú zafarbené modrou fialovou a gram negatívnou baktériami červenej.

Niektoré laboratóriá prestali používať techniku ​​gram-hucker na prijatie modifikovanej techniky gram-kopeloff. V poslednom menovanom prípade sa safranín nahradí základným fuchsinom. Je to preto, že safranín slabo zafarbí druhy rodov Legionla, Campylobacter a Brucella.

Techniky v histologickej oblasti

Farbenie buniek Kulchitsky (enterokromofíny)

Tkanivové rezy gastrointestinálneho traktu so strieborným chloridom sú zafarbené. Potom je sfarbený sodným tiosírantom a nakoniec si najíma safranínom.

Kulchitské bunky sa vyznačujú, pretože sú prezentované s čiernymi hnedými granulami.

Farbenie na detekciu osteoartritídy

Safranine, pretože má kladné zaťaženie, karboxy a sulfátové skupiny glykosaminoglykánov sa veľmi dobre viaže. Sú súčasťou proteoglykánov, ktoré tvoria kĺbovú chrupavku. V tomto zmysle, keď farbenie s safranínom alebo, je možné zistiť, či došlo k strate chrupavky.

Strata chrupavkového tkaniva sa môže merať prostredníctvom stupnice Mankin alebo tiež nazývaná stupnica osteoartritídy.

Táto technika sa potom vysvetľuje: Histologický rez je ponorený do podnosu s Weigertovým železitým hematoxylínom roztoku, potom sa prechádza kyslým alkoholom a premyje sa vodou.

Pokračujte v procese sfarbenia ponorením listu v rýchlej zelenej farbe, premyje sa kyselinou octovou a teraz ponorí do safranínu alebo. Na dokončenie procesu je dehydratovaný pomocou alkoholov v rôznych koncentráciách v stúpajúcom poradí. Posledný krok vyžaduje, aby sa vzorka objasnila Xileno alebo Xilol.

Môže vám slúžiť: metaloidy

Listy sú podmienené balzamom Kanady alebo podobné, ktoré sa majú pozorovať pri mikroskope. 

S touto technikou sú jadrá farbené čiernou farbou, zelenú kosť a chrupavku, kde sa nachádzajú červené proteoglykány.

Tindion na identifikáciu makroalgov

Pérez a kol. V roku 2003 navrhli jednoduchú a ekonomickú techniku ​​na farbenie makroalgov. Vzorky sa pripravujú v histologických rezu s parafínom. Škrty sú nastavené s 1% glycerínom, nechajte sa úplne vyschnúť. Potom sa umiestni do xylolu, aby sa eliminoval parafín.

Strih je rehydratovaný, vďaka čomu prechádza celým radom zásobníkov, ktoré obsahujú etanol v rôznych stupňoch koncentrácie (zostupný poriadok), v každom 2 minút.

Následne sa zafarbí 5 minút so zmesou 3: 1 s 1% safranínu s 1% toluidínovou modrou, obidve pripravené s 50% etanolom. Zmes sa pridáva tri kvapky kyseliny pikrovej, ktorá pôsobí ako mordant.

Potom sa opäť dehydruje cez podnosy z alkoholu, ale tentokrát stúpanie. Nakoniec je objasnená s Xilol a vzorka je pripravená s balzamom Kanady, ktorý sa má pozorovať.

Toxicita

Našťastie je Safranine farbivo, ktoré nepredstavuje nebezpečenstvo pre tých, ktorí s ním manipulujú. Je to neškodné farbivo, nie je karcinogénne a nie je ani horľavé.

Pri priamom kontakte s pokožkou alebo sliznicami môže spôsobiť mierne začervenanie oblasti bez veľkých komplikácií. Z tohto dôvodu sa odporúča umyť postihnutú oblasť veľkým množstvom vody.

Odkazy

1. Garcia h. Farbivo Safranine alebo. Zdravotná technika, 2012; 1 (2): 83-85. K dispozícii na: MediGraphic.com
2. Gil m. Gram Farbining: Nadácia, materiály, technika a použitie. 2019. K dispozícii na: Lofede.com
3. Gil m. Farbenie spór: Nadácia, techniky a použitia. 2019. K dispozícii na: Lofede.com
4. Safranín.„ Wikipedia, encyklopédia zadarmo. 7. marca 2017, 10:39 UTC. Pred rokom 2019, 20:49 je.Wikipedia.orgán
5. Pérez-Cortéz S, Vera B, Sánchez C. Užitočná sfarbenie techniky v anatomickej interpretácii Graciázne tenuifrony a Gracilaria chilensis (Rhodophyta). Čin. Venez. 2003; 26 (2): 237-244. K dispozícii na: SCIELO.orgán.
6. Kostol Aleika, Peralta Esther Lilia, Alvarez Elba, Militán J, Matos Madyu. Pomer funkčnosti xylemových ciev a prítomnosť Leifsonia xyli subp. Xyli. Otáčať sa. Ochrana veg. 2007; 22 (1): 65-65. K dispozícii na: SCIELO.SLD