Nadácia xantoproteickej reakcie, postup, použitie

Ten Xantoproteická reakcia Je to chemický postup, ktorý sa používa na stanovenie prítomnosti alebo neprítomnosti aromatických aminokyselín, ako je tyrozín a tryptofán, ktoré môžu byť voľné alebo tvoriace rozpustné proteíny, peptidy alebo polypeptidy.

Používa sa tiež na detekciu toxických látok na úrovni krvi, ktoré obsahujú v jej štruktúre beancenickú skupinu. Tento test je známy aj ako Becher Xantoproteic reakcia.

Pozitívny zdroj Xantoproteickej reakcie: prevzatý z videa: https: // youtu.Be/gzgmbw5w4wo

Xantoproteická reakcia používa koncentrovanú kyselinu dusičnú, teplo a neutralizujúce alkali. Ak sa pri neutralizácii reakcie roztoku žltého až oranžového roztoku považuje za pozitívny. Pozorované sfarbenie je spôsobené tvorbou dusíkových zlúčenín odvodených z nitrifikácie benzénnych skupín.

Ak potrebujete kvantifikovať množstvo celkových proteínov, je potrebné použiť iné metódy určovania proteínov, ako napríklad biuret.

Xantoproteická reakcia sa používa hlavne pri analýze látok, na ktoré nie je známa jeho chemické zloženie. Všeobecne je táto reakcia súčasťou súboru testov, ktoré pomôžu určiť chemické zloženie špecifickej látky alebo extraktu. Preto ho vedci široko používajú.

Na druhej strane sa na detekciu fenolových a indolických látok v krvi používa Becherova xantoproteická reakcia, čo je možné predpovedať výskyt nefropatie skôr, ako sa zvýšia ďalšie parametre.

[TOC]

Základ

Reakcia v podstate detekuje prítomnosť benzénovej skupiny, a to v aminokyselinách, ako v proteínoch a peptidoch. Kyselina dusičná pôsobí na aminokyselinový bencenický kruh, ktorý ho má, a tvorí fenolové dusičnany.

Reakcia je potrebné vykonať teplo, zvyčajne sa vytvorí zrazenina, ktorá oblatí médium, čo robí mliečny. Zrazenina môže byť biela alebo žltá. Nakoniec vyžaduje alkalizačný krok, ktorý zvýrazňuje farbu. Na tento účel sa používa 40% alebo hydroxid sodný amoniak.

Reakcia sa bude interpretovať ako pozitívna, ak sa počas tmavého zahrievania alebo oranžového procesu pozoruje silné žlté sfarbenie. Detegované aminokyseliny sú hlavne tyrozín a tryptofán.

Xantoproteická reakcia. Zdroj: http: // esteroisomeras.Blog.com/2013/06/Charakterizácia proteínov.Html

V prípade fenylalanínu, hoci ide o aromatické aminokyseliny, benzénové jadro tejto aminokyseliny je ťažké dusiť sa v jednoduchej reakcii, preto bude emitovať alebo negatívne alebo slabo pozitívna reakcia.

Môže vám slúžiť: Polarita (chémia): Čo je, definícia, príklady

Všeobecne platí, že Xantoproteický test môže byť doplnený testom Hopkins-Cole, ktorý slúži na špecifickú identifikáciu triptofánu. Ak je Xantoproteický test pozitívny a test Hopkins-Cole je negatívny, prítomnosť tryptofánu sa v tomto roztoku vyradí, čo vedie k prítomnosti hlavne tyrozínu. Podobne sa môže okrem iného doplniť Millonovou reakciou na detekciu tyrozínu.

Táto reakcia sa môže použiť aj na vzorky krvi, plazma alebo nezmenené sérum na diagnostiku uremie alebo obličkového nedostatku. V tomto prípade je hľadaná detekcia toxických látok (fenolických a indolických) produkovaných z črevnej hniloby.

Tieto látky majú benzénnu skupinu, a preto poskytujú pozitívnu xantoproteickú reakciu, hoci reakčné látky nie sú ani aminokyselinou ani proteín.

Postup

- Xantoproteická reakcia na detekciu aminokyselín s aromatickými skupinami

Umiestnite 1 ml problémovej vzorky do čistej a suchej skúmavky.

-Pridajte 0,5 ml koncentrovanej kyseliny dusičnej.

-Inkubujte zmes v kúpeľni 70 ° C počas 2 minút. Predtým pripravte kúpeľ Maria pri vyššie uvedenej teplote.

-Keď vezmete trubicu z kúpeľa Maria, je možné poznamenať, že roztok sa stal mliečnym a vzal nejaké žltkasté biele sfarbenie.

-Roztok sa ochladí vyhodením studenej vody na spodok trubice.

-Príprava sa údajne pomaly (pokles na pokles) 40% roztoku hydroxidu sodného, ​​kým nedôjde k farebnému šoku.

-Ak je test pozitívny, v rozhraní kvapaliny sa vytvorí tmavý oranžový krúžok.

-Ak je reakcia negatívna, nedôjde k formácii farieb.

- Xantoproteická reakcia na detekciu fenolových a indolických látok v krvi

-Dávku 5 cm3 kyseliny trichlóroctovej pri 20% nad 5 cm3 žilovej krvi, plazmy alebo séra, pričom posledne menovaná je najznámejšia. Dobre premiešajte a filtrujte.

Môže vám slúžiť: kyselina dusičná (HNO3)

-2 ccm filtrovania sa odoberú a zmieša sa s 0,5 cm3 kyseliny dusičnej. Potom sa zahrieva na varenie, pretože trubica je umiestnená priamo na plameň zapaľovača po dobu 30 sekúnd. Ochladzuje vodou a pridajte 1,5 chloridu sodného na 33%.

Vykladá sa takto:

-Negatívny výsledok: žltkastá farba.

-Pozitívny výsledok (+) citrónová žltá.

-(++) Zlato žltá.

-(+++) tmavo žltá až hnedá

Môže sa tiež interpretovať pomocou referenčnej kolorimetrickej stupnice Auenrieth, vytvorenej rôznymi koncentráciami bicromato draselného. Toto sa pripravuje v riedeniach 10 z 10 z materského roztoku 0,03874%. Každá trubica predstavuje percento.

Interpretačné stupnice

Existujú dve interpretačné stupnice nazývané starodávne a moderné. Normálne hodnoty sú:

Stará tabuľka: medzi 75 a 85%

Moderná tabuľka: medzi 15 a 25%

Ak je farba problémovej trubice v strede dvoch trubíc pre trubice, urobí sa medzi oboma opatreniami priemer.

Roztok dichromátu draslíka sa pripravuje nasledovne: 7 sa meria.9 ml dichromátu draselného pri 10 N a je spláchnutá až 100 ml v Aggorado Ball. Pre riedenia sa sleduje, ako je znázornené v kolorimetrickej tabuľke Autenrieth.

Kolorimetrická tabuľka Autenrieth. Zdroj: Vásquez a. Xantoproteická reakcia. Španielsky klinický časopis. 1949; 35 (5): 326-327. K dispozícii na: Elsevier

Využitie

Použitie xantoproteickej reakcie je súčasťou súboru biochemických testov, ktoré pomáhajú poznať chemické zloženie neznámeho látky. Tento test prispieva k chemickej analýze Detekcia proteínov obsahujúcich benzénové skupiny v ich štruktúre.

Túto reakciu široko používajú vedci v rôznych štúdiách látok.

V tomto zmysle Vásquez-Jorge a spolupracovníci použili túto a ďalšie reakcie na skúmanie obsahu bielkovín v tekutinách extrahovaných z mangrovovej osi (Crassostrea Rhizophorae).

Podobne aj Rojas a spolupracovníci (2009) použili sériu testov, medzi ktorými je Xantoproteická reakcia, na analýzu glykomakropéptidov v precipitátoch Lactosueros de Ricotta.

Na druhej strane, Becherova xantoproteická reakcia bola modifikovaná Volhardom tak, aby sa použila na iné účely. V tomto prípade na detekciu fenolických a indolických látok, ktoré sa môžu objaviť oveľa skoršie (týždne alebo mesiace), sa zvyšujú hladiny močoviny a zvyškového dusíka v krvi.

Môže vám slúžiť: CERIO: Štruktúra, vlastnosti, získanie, použitia

Tento toxický odpad sa tvorí z črevnej hniloby potravín.

Tieto látky sa hromadia v krvi, keď nie sú riadne eliminované, a preto pozitívny Xantoproteický test môže predpovedať rýchle vytvorenie samotného zlyhania obličiek alebo stavu uremia.

Podľa intenzity farieb môžete určiť, ako je pokročilá. V tomto prípade je test kvantitatívny.

U zdravých ľudí tento test dáva miernu žltú farbu, ktorá zodpovedá normálnym hladinám tryptofánu a tyrozínu, ktoré môžu byť v krvi.

Zatiaľ čo u pacientov s obličkami dodáva xantoproteická reakcia silne pozitívnu v dôsledku prítomnosti nasledujúcich látok: fenol, indol, paracresol, aromatické oxy kyseliny,.

Prevencia

Tento test musí vykonať vyškolení odborníci. Mali by sa brať do úvahy všetky normy biologickej bezpečnosti, pretože použité činidlá sú kyseliny a korozívne základne.

Ak náhodou spadnú niekoľko kvapiek kyseliny dusičnej na koži alebo nechty, zažltne, pretože obe štruktúry obsahujú proteíny. Okrem toho na koži a sliznici spôsobuje vážne popáleniny.

Ak dôjde k kontaktu s pokožkou, musí byť protokolom, aby sa oblasť okamžite premyla mydlom a vodou približne 20 minút.

Ak postriekate očami, musíte si umyť s množstvom sladkej vody a snažiť sa udržať oči otvorené.

Odkazy

1. „Reakcia Xantoproteica“ Wikipedia, encyklopédia zadarmo. 2. septembra 2019, 17:49 UTC. 21. októbra 2019, 20:31 Wikipedia.org/
2. Vásquez-jorge a Guerra-Molina L, Quintana-Tamayo J, Ramírez-Arzuaga J, Fernando-Ballesteros R, Vásquez-Jorge a. Fyzikálno -chemická charakterizácia a obsah proteínov v extraktoch tekutín z mangrovovej osi (Crassostrea Rhizoforae). Kubánska chémia, 2014; 26 (1): 66-74. K dispozícii v redalyc.
3. Rojas E, Valbuena E, Torres G, García A, Piñero M, Galindo L. Izolácia a výkon GMP zrážaním Lactosuero s kyselinou triclooctovou. Vedec. (Maracaibo) 2009; 19 (3): 295-302. K dispozícii na: VE.Scilo.
4. Vásquez a. Xantoproteická reakcia. Španielsky klinický časopis. 1949; 35 (5): 326-327. K dispozícii na: Elsevier
5. Gálvez I, Gárate alebo. Becher a Andrewes Reakcie pri chirurgii moču. Urologická služba španielskej nemocnice. Argentínsky časopis Urology 395-404