Nadácia vysokej účinnej kvapalinovej chromatografie (HPLC), vybavenie, typy

Ten Vysoko účinná kvapalina chromatografia Je to inštrumentálna technika používaná v chemickej analýze, s ktorou sa umožňuje oddeliť zmesi, čistiť a kvantifikovať jeho komponenty, ako aj vykonávať ďalšie štúdie. Je známa s skratom HPLC, odvodenou z angličtiny: Vysoko výkonná kvapalina chromatografia.

Ako poukazuje na jeho názov, funguje tak manipulovaním s tekutkami. Pozostávajú zo zmesi zloženej z analytu alebo vzorky záujmu a jedného alebo viacerých rozpúšťadiel, ktoré pôsobia ako mobilná fáza; To znamená ten, ktorý ťahá analyt v celom tíme HPLC a stĺpca.

Vybavenie HPLC. Zdroj: DQWYY [CC BY-SA 4.0 (https: // creativeCommons.Org/licencie/By-SA/4.0)]

HPLC je široko šírená laboratóriami analýzy kvality v mnohých spoločnostiach; ako sú farmaceuti a jedlo. Dotknutý analytik musí pripraviť vzorku, mobilnú fázu, skontrolovať teplotu a ďalšie parametre a umiestniť cesty do kolesa alebo karuselu tak, aby zariadenie automaticky vykoná vstrekovanie.

Zariadenie HPLC je spojené s počítačom, pomocou ktorého je možné pozorovať generované chromatogramy, ako aj začať analýzu, riadiť tok mobilnej fázy, program Elution (izokratický alebo gradientom) a zapnite detektory (UV (UV -VIS alebo hmotnostný spektrofotometer).

[TOC]

Základ

Na rozdiel od konvenčnej kvapalinovej chromatografie, ako je papier alebo stĺp naplnený gélom siliky. Namiesto toho pracujte s vysokými tlačovými čerpadlami, ktoré zavlažujú mobilnú alebo eluentnú fázu cez stĺpec s väčšou intenzitou.

Týmto spôsobom to nie je potrebné.

Môže vám slúžiť: karbonoidy: prvky, vlastnosti a použitia

Účinnosť tejto techniky však nie je spôsobená výlučne týmto detailom, ale aj drobnými výplňovými časticami, ktoré tvoria stacionárnu fázu. Keďže je jeho oblasť kontaktu s mobilnou fázou menšia, je väčšia, takže bude interagovať do lepšieho stupňa s analytom a jeho molekuly budú viac oddelené.

Tieto dve charakteristiky plus skutočnosť, že táto technika umožňuje spojenie detektora, zvyšuje HPLC oveľa vyššiu ako chromatografia s jemnou alebo papierovou vrstvou. Separácie sú efektívnejšie, mobilná fáza sa pohybuje lepšie v stacionárnej fáze a chromatogramy umožňujú zistiť určitú analýzu v analýze.

Vybavenie

Zjednodušený diagram prevádzky zariadenia HPLC. Zdroj: Gabriel Bolívar.

Zjednodušený diagram je uvedený vyššie, ako funguje tím HPLC. Rozpúšťadlá sa nachádzajú v ich príslušných nádobách, usporiadané s hadicami, aby čerpadlo prenieslo do zariadenia malý objem; Máme mobilnú fázu.

Mobilná alebo eluentná fáza musí byť najprv opotrebovaná, aby bubliny neovplyvnili separáciu analytických molekúl, ktoré sa zmieša s mobilnou fázou, keď zariadenie urobí injekcie.

Chromatografický stĺpec sa nachádza vo vnútri rúry, ktorá umožňuje regularizáciu teploty. Pre rôzne vzorky teda existujú primerané teploty na dosiahnutie vysokých výkonov, ako aj široký katalóg stĺpcov a typ výplne alebo stacionárnych fáz pre špecifickú analýzu v špecifickej analýze.

Mobilná fáza so rozpusteným analytom vstupuje do stĺpca a z nej najprv elukul molekuly, ktoré „cítia“ menšiu afinitu k stacionárnej fáze, zatiaľ čo potom eluauujú tie, ktoré sú ním najviac zachované. Každá molekula Eluida generuje signál vizualizovaný v chromatograme, kde sa pozorujú retenčné časy samostatných molekúl.

Môže vám slúžiť: skvapalnenie: koncept, plyny, pôdy a seizmické, kľúčové

A na druhej strane, mobilná fáza po prechode detektorom končí v nádobe na odpad.

Typy HPLC

Existuje veľa typov HPLC, ale medzi všetkými z nich sú najvýznamnejšie.

Chromatografia s normálnou fázou

Normálna fázová chromatografia sa vzťahuje na fázu, kde je stacionárna fáza polárna povaha, zatiaľ čo mobilný mobilný telefón apolar. Aj keď sa to nazýva normálne, v skutočnosti je to najmenej používané, je to inverzná fáza najrozšírenejšia a najúčinnejšia a najúčinnejšia.

Chromatografia inverznej fázy

Ako inverzná fáza je teraz stacionárna fáza apolar a polárna mobilná fáza. Je to užitočné najmä v biochemickej analýze, pretože veľa biomolekúl sa lepšie rozpustí vo vode a polárnych rozpúšťadlách.

Chromatografia výmeny iónov

V tomto type chromatografie sa analyt s kladným alebo negatívnym zaťažením pohybuje cez stĺpec, ktorý nahradí ióny, ktoré uvádza. Čím väčšie je zaťaženie, tým väčšie je jeho retencia, takže sa široko používa na oddelenie kovov prechodu iónov.

Chromatografia

Táto chromatografia, skôr ako separovanie, je zodpovedná za čistenie výslednej zmesi. Ako už názov napovedá, analyt je oddelený už v závislosti od toho, ako súvisí so stacionárnou fázou, ale podľa jeho molekulárnej veľkosti a hmotnosti.

Najmenšie molekuly sa zachovajú viac ako veľké molekuly, pretože tieto nie sú zachytené medzi pórmi polymérnych výplne kolónov.

Žiadosti

HPLC umožňuje kvalitatívnu aj kvantitatívnu analýzu. Pokiaľ ide o kvalitatívnu, pri porovnaní retenčných časov chromatogramu za určitých podmienok je možné zistiť prítomnosť konkrétnej zlúčeniny. Táto prítomnosť môže naznačovať ochorenie, falšovanie alebo užívanie drog.

Môže vám slúžiť: rozpustená a rozpúšťadlo

Preto je tím súčasťou diagnostických laboratórií. Podobne je to v farmaceutickom priemysle, pretože umožňuje overiť čistotu produktu, ako aj jeho kvalitu, pokiaľ ide o jeho rozpustenie v žalúdočnom prostredí. Východiskové materiály sa tiež podrobia HPLC, aby ich očistili a zaručovali lepší výkon v syntéze liekov.

HPLC vám umožňuje analyzovať a oddeliť komplexné proteínové zmesi, aminokyseliny, uhľohydráty, lipidy, porfyríny, terpenoidy a v podstate je to vynikajúca voľba pracovať s rastlinnými extraktmi.

A nakoniec, chromatografia molekulárnej exklúzie vám umožňuje vybrať si polyméry rôznych veľkostí, pretože niektoré môžu byť menšie alebo veľké. Týmto spôsobom sa získajú výrobky s nízkym alebo vysokým priemerným molekulárnym hmotnosti, čo je určujúcim faktorom v jeho vlastnostiach a budúcich aplikáciách alebo syntéze.

Odkazy

1. Deň, r., & Underwood, a. (1989). Kvantitatívna analytická chémia. (Piate ED.). Pearson Prentice Hall.
2. Bussi Juan. (2007). Kvapalina s vysokou účinnosťou. [PDF]. Obnovený z: prstu.Edu.oh
3. Wikipedia. (2019). Vysoko výkonná kvapalná chromatografia. Zdroj: In.Wikipedia.orgán
4. Clark Jim. (2007). Vysoko výkonná kvapalina chromatografia. Získané z: Chemguide.co.Uk
5. Matthew Barkovič. (5. decembra 2019). Vysoko výkonná kvapalina chromatografia. Chémia librettexts. Získané z: Chem.Librettexts.orgán
6. G.P. Thomas. (15. apríla 2013). Vysokoúčinná kvapalinová chromatografia (HPLC) - Metódy, výhody a aplikácie. Získané z: Azom.com