Selenito bujón, čo je, nadácia, príprava, používa

On Selenito Je to selektívne kvapalinové kultivačné médium. Navrhol ho Leifson na obohatenie vzoriek, kde je podozrivá prítomnosť enteropatogénnych baktérií rodu Salmonella.

Toto médiá spĺňa požiadavky Americkej asociácie verejného zdravia (APHA), a preto je okrem iného akceptované na vyšetrenie prítomnosti Salmonella vo vzorkách stolice, moču, tekutých alebo tuhých potravín, vody, vody.

Selenito. Zdroj: Fotografia, ktorú urobil autor MSC. Marielsa Gil

Chemické zloženie, ktoré uprednostňuje regeneráciu týchto mikroorganizmov a zase inhibuje rast ostatných. Je to hlavne toxické pre väčšinu baktérií patriacich do rodiny Enterobacteriae. Umožňuje však aj regeneráciu kmeňov Shigella a neinhibuje rast pseudomonas a proteus.

Skladá sa z bezvodého vodíka sodného, ​​bezvodého fosforečnanu sodného, ​​peptonov a laktózy. K dispozícii je tiež variant, ku ktorému sa pridáva Cistina, a preto jej meno Selenito-Cistina bujón.

V súčasnosti sa uprednostňuje použitie selenito-cistine bujónu, pretože sa získa vyššie percento zotavenia salmonelou, ktorá je pozorovaná s inými selektívnymi prostriedkami s rovnakým účelom, ako je napríklad bujón teterátu sodného.

Základ

Peptóny obsiahnuté v vývaru slúžia ako živiny pre dobrý vývoj mikroorganizmov. Kmene Salmonella používajú peptones ako zdroj dusíka, vitamínov a aminokyselín.

Laktóza je fermentovateľná uhľohydrát, zatiaľ čo selenit sodný je látkou inhibítora, ktorá spomaľuje rast gramovo pozitívnych baktérií a väčšiny baktérií prítomných v črevnej flóre, najmä v rodine Enterobacteriae. Fosforečnan sodný je tlmič nárazu, ktorý stabilizuje stredné pH.

Môže vám slúžiť: Chemiosteate: Charakteristiky, história a použitie

V prípade variantu Selenito, ktorý obsahuje L-Cistine, je táto dodatočná zlúčenina redukčným činidlom, ktoré minimalizuje toxicitu selenitu, čím sa zvyšuje zotavovanie salmonelly.

Príprava

-Selenito

Ak máte komponenty zmesi, môžete vážiť:

4 GR bezvodého vodíka sodného.

10 GR bezvodého fosforečnanu sodného.

5 gpón.

4 g z laktózy.

Rozpustite zlúčeniny v 1 litri sterilnej destilovanej vody. Môže sa mierne zahriať, aby sa rozpustil ako celok.

Niektoré laboratóriá vystavujú médium na 10 minút v pary Fluente, aby ho sterilizovali, pretože by sa nemal používať autokláve. Ak je médium sterilizované, môže byť uložené v chladničke až do jeho použitia.

Môže sa tiež pripraviť bez sterilizácie a servírovania 10 až 15 ml do sterilných skúmaviek.

V takom prípade by ste mali okamžite nechať stáť a používať. Pretože médium nie je sterilné, nemôže byť uložené v chladničke na neskoršie použitie.

-Príprava komerčných médií

Ak je k dispozícii komerčné médium, 23 GR dehydratovaného média a rozpustené v liter sterilnej destilovanej vody. Krátko zahrievame na dokončenie rozpustenia. V autokláve sa nesterilizujte. Asepticky podávajte 10 alebo 15 ml v sterilných skúmavkách.

Konečné pH média musí byť 7,0 ± 0,2.

Je potrebné poznamenať, že farba dehydratovaného média je béžová a príprava je jasná a priesvitná jantárová.

Variant selenito-cistine bujón

Obsahuje rovnaké zlúčeniny selenitu, ale pridá sa 10 mg cystiny. Zvyšok postupu je presne rovnaký, ako je opísané vyššie.

Môže vám slúžiť: parafilitetická skupina

Žiadosti

Toto médium je špeciálne na použitie v epidemiologických štúdiách, v prípadoch, keď choroba nie je v akútnom štádiu, asymptomatických pacientov alebo zdravých nosičov.

Izolácia rodovej salmonely je zvyčajne náročná, pretože normálne kontaminujú vzorky narazovým spôsobom. Byť v orech.

Na druhej strane sú suroviny, s ktorou sa často pripravujú spracované potraviny.

Preto sa Salmonella prítomné v surovinách zle zaobchádza predložením produktu do vyššie uvedených priemyselných procesov. Podobne v prípade klinických vzoriek, ako sú výkaly, môžu byť kmene slabé, ak pochádzajú od pacientov, ktorí boli liečení antibiotikami.

Preto je podozrenie na prítomnosť salmonel, ktorá musí byť obohatená v bujóne Lactosado a následne obohatená v selenito bujóne, aby sa optimalizoval jeho zotavenie vo selektívnych médiách, ako je SS Agar, Xilosa Agar, de -xikolate Lysine (XLD) , Hoktoen Enteric (He) a Green Apar -Brillante,.

Vysiať

Pre vzorky stolice berte 1 g vzorky a suspendujte v trubici s 10 až 15 ml vývaru Selenito. Ak sú výkaly tekuté, zoberte 1 ml a pozastavte sa v vývaru. V prípade rektálnych tampónov si stiahnite materiál na tampón do vývaru.

Vo vzorkách tuhých potravín vezmite 1 GR a pozastavte sa v bujóne Selenito.

V tekutých potravinách sa zmes v rovnakých častiach s dvojitou koncentráciou selenitového vývaru.

Môže vám slúžiť: Halucicenria

Pre vzorky moču musíte odstrediť, zlikvidujte supernatant, vziať si všetok sediment a pozastaviť ho v bujóne Selenito.

Vývary pri 37 ° C sa inkubujú 24 hodín inkubácie. Bakteriálny rast je svedcom zákalu. Na inkubáciu 42 ° C sa môže zahrnúť aj ďalšia trubica na vzorku. Následne zasienite selektívne tuhé médiá z vývaru Selenito.

Qa

Pre reguláciu sterility sa 37 ° C inkubuje po dobu 24 hodín, selenito vývar z každého pozemku bez naočkovania. Očakáva sa, že neexistuje zákal, žiadna zmena strednej farby.

Na kontrolu správneho fungovania média sa môžu použiť známe kmene, napríklad:

Salmonella Enteritidis ATCC 13076, Salmonella typhimurium ATCC 14028,  Salmonella choleraesuis ATCC 12011, Escherichia coli ATCC 25922 a Proteus mirabilis ATCC 43071.

Očakávané výsledky sú:

• Pre prvé tri bakteriálne kmene musí byť rast uspokojivý.
• Pre Escherichia coli Čiastočná inhibícia.
• Pre mierny rast proteus.

Obmedzenia

Polovičný vývar je toxický pre ľudskú pokožku, preto by sa malo vyhnúť priamemu kontaktu.

Odkazy

1. Británske laboratóriá. Selenito. Dostupné na: BritánAlab.com
2. Neogen laboratórium. Selenito. K dispozícii na: Potravinová bezpečnosť.Neogén.com