Laktosado vývar

Lakované vývary zakalene. Zdroj: Fotografia, ktorú urobil autor MSC. Marielsa Gil

Čo je laktosado vývar?

On Laktosado vývar Je to tekutá kultúra, nie selektívna, použitá hlavne ako prostriedok predbežného obohatenia v izolácii kmeňov Salmonella, Z mikrobiologickej analýzy vyrobenej pre spracované potraviny, mliečne výrobky alebo vodu. Odporúča to Medzinárodná komisia pre mikrobiologické špecifikácie pre potraviny (ICMPF).

Médium obsahuje enzymatickú želatínu, mäso a laktózu, látky potrebné na bakteriálny rast. Okrem toho je laktóza fermentovateľné sacharidy, a preto sú niektoré koliformné schopné ho rozvinúť pomocou výroby plynu.

Preto je laktosado bujón odporúča Americká asociácia verejného zdravia (APHA) pre predpokladanú štúdiu celkových a fekálnych koliformných baktérií. Je opísaná ako vynikajúca alternatíva na nahradenie lauil sulfátového triptózy v štandardnej technike najpravdepodobnejšieho počtu (NMP), ktorá sa používa na mikrobiologickú analýzu vzoriek potravín, mlieka a povrchových vôd, podzemných, rekreačných, domácich a priemyselných zvyškov.

Základ

Pre mikrobiologickú analýzu niektorých vzoriek je priechod predbežného obohatenia nevyhnutný na získanie špecifického mikroorganizmu, ktorý môže byť vo veľmi nízkom množstve alebo v nezvážených podmienkach, ktoré porušujú alebo minimalizujú jeho životaschopnosť. 

To je prípad suchých a spracovaných potravín, prípadne kontaminovaný Salmonellas SP. V týchto prípadoch, ak sú prítomné baktérie, počas procesu výroby výrobkov utrpeli fyzikálne a chemické zneužívanie.

Takým spôsobom, že mikroorganizmy sú vystavené nepriaznivým faktorom, ako je dehydratácia, expozícia inhibičným alebo toxickým produktom a prekrývanie generované prítomnosťou iných baktérií vo väčšom množstve, okrem iného.

V tomto zmysle má laktosado vývar na opravu poškodených štruktúr mikroorganizmu, čo spôsobuje, že sa zotaví a reprodukuje tak, aby sa dá zistiť.

Podobne má laktosado bujón schopnosť zriediť inhibičné látky, ktoré môžu ovplyvniť jeho životaschopnosť, čo umožňuje jeho vývoj. Nutričné ​​zloženie laktického vývaru je navyše strategické na zvýšenie rastu Salmonella SP nad ostatnými mikroorganizmami.

Môže vám slúžiť: paleobiológia: história, špeciality, objavy

Pri konečnej identifikácii musí byť subkultúrna voči iným definitívnym kultúram.

Na druhej strane zloženie média tiež umožňuje detegovať fermentárne mikroorganizmy laktózy, ktoré produkujú plyn.

Príprava

Na prípravu liter laktózového vývaru musí 13 gramov dehydratovaného média zvážiť a rozpustiť v 1.000 ml destilovanej vody.

Aby ste pomohli rozpustiu média vo vode, môžete roztok trochu zahriať, ale nie príliš veľa.

Akonáhle je homogénny, roztok sa pripravuje nasledovne: Ak sa vývar použije na vyhľadávanie koliformných, pripravuje sa šok s testovacími trubicami, ktorý sa zavedie fermentačnou trubicou Durham dole dole.

Durhamova trubica je veľmi dôležitý detail, pretože umožní tvorbu plynu, údaje s veľkou hodnotou pri hľadaní koliformov.

Pripravené trubice, 10 ml laktosado vývaru je v nich prepustených, množstvo, ktoré musí stačiť na zakrytie celej trubice Durham.

Ak sa laktosado bujón použije ako predvýrazný vývar, nie je potrebné umiestniť fermentáciu Durham Fermentation. V tomto prípade sa vyžaduje viac stredného (225 ml), ktoré sa podáva v 500 ml nádobách, široké ústa a s tepelným krytom niť.

Následne sa trubice alebo fľaše odnesú do autoklávu pri 121 ° C počas 15 minút.

Médium musí byť na konečnom pH 6.9 ± 0.2 až 25 ° C.

Vývary sú uložené v chladničke až do použitia. Pred použitím musia temperovať pri izbovej teplote.

Na druhej strane, laktosado vývar môže byť tiež pripravený pri dvojitej koncentrácii.

Môže vám slúžiť: Herpetologia: História, zbierky, funkcia herpetolog

Niektoré laboratóriá dodávajú Brome. V tomto prípade vývar má fialovú farbu a ak dôjde k zmenám fermentácie na žltej farbe.

Žiadosti

V mikrobiologických laboratóriách sa laktosado bujón široko používa, pretože je to relatívne ekonomické médium, ktoré ponúka spoľahlivé a rýchle výsledky (24-48 hodín).

Môže sa použiť na analýzu celkových a fekálnych koliformov vo vode a potravinách alebo ako predprítomný vývar pre Salmonella.

Predbežné obvinenie

Predbežné obohatenie je krok pred obohatením vzorky, čo výrazne zlepšuje zotavenie rodových baktérií Salmonella V spracovaných potravinách.

Na tento účel sa vzorka tuhých potravín (25 gramov) alebo tekutiny (25 ml) vysiela v 225 ml laktosado bujónu a inkubuje 24 až 48 hodín. Následne bude subkultúrny v médiu obohatenom ako selenito bujón cistina alebo Tetrationato vývar. Potom prejdite na selektívne médiá XLD a SS.

Celková a fekálna koliformná analýza

Je to vynikajúce médium ako indikátor fekálnej kontaminácie.

Preto je laktosado bujón ideálny pre predpokladanú fázu štúdie koliformnej metódy najpravdepodobnejšou metódou čísla.

Pre vzorky, v ktorých je podozrenie na veľké množstvo koliformných, bude naočkované nižšie množstvo toho istého (1 ml), zatiaľ čo pre vzorky, v ktorých sú podozrivé menšie koliformné, je naočkovaný väčší objem odberu vzoriek (10 ml).

Pre analýzu sa uskutoční 10^-1, 10^-2, 10^-3, Vytváranie batérie 3-5 potrubia pre každú použitú koncentráciu.

Z každého zriedenia sa rovnaký objem vysiava na laktosado bujóny.

Skúmavky sa inkubujú 24 hodín. Bujóny, ktoré sú negatívne, sa inkubujú o 24 hodín viac.

Môže vám slúžiť: fauna a flóra peruánskeho mora

Interpretácia výsledkov sa vykonáva pozorovaním dvoch charakteristík: prvá je prítomnosť alebo neprítomnosť zákalu, a keďže toto médium neobsahuje indikátor pH, nedôjde k zmene farby.

Druhým je výroba plynu. Plyn je ľahko preukázaný v trubici Durham, vzhľadom na výskyt jedného alebo niekoľkých vzduchových bublín vo vnútri.

Považuje sa za pozitívne, ak sa pozorujú obe charakteristiky, to znamená zákal pri výrobe plynu. Pozitívne trubice musia byť zamietnuté v potvrdzovacích médiách (2% jasný žlčový zelený vývar a vývar EC).

Kontrola strednej kvality

• Pri príprave média je dôležité nezabudnúť umiestniť trubice Durhams, ak je ich účelom štúdium koliformov.
• Pred sterilizáciou neprehrievajte médium.
• Pred sterilizáciou distribu.
• Nepoužívajte, ak má médium pripravené viac ako 3 mesiace.
• Nepoužívajte, ak sa pozoruje akákoľvek zmena obvyklých charakteristík média.
• Pri príprave dávky vývaru Lactosado musíte dokázať kvalitu rovnakých sejských kmeňov známych ako Escherichia coli, Enterobacter Aerogenes, Citrobakter freundii a Klebsiella pneumoniae. Rastie veľmi dobre, s výrobou plynu (pozitívna kontrola).
• Môže tiež zahrnúť Pseudomonas aeruginosa, Salmonella Tyfimurium ani Enterococcus faecalis, Rastú dobre, ale bez výroby plynu (negatívna kontrola).
• Musí čakať, že pôvodná farba dehydratovaného média je béžová a veľmi jasná a priehľadná žltá pripravená médium. Ak sa pozoruje zmena farby alebo vzhľadu, môže dôjsť k zhoršeniu toho istého.

Odkazy

1. Acevedo r., Severiche, C., Castillo, m. Environmentálna biológia a mikrobiológia. University of Cartagena, Kolumbia.
2. Laboratóriá Conda pronadisa. Dvojitá koncentrácia laktózy (European Pharm).