Jasne zelený agar, nadácia, príprava, použitia

On Jasne zelený agar Je to pevné kultivačné médium s vysokým stupňom selektivity. Používa sa výlučne na izoláciu kmeňov rodu Salmonella; Existujú však určité výnimky, ako napríklad druhy Typhi a Parathyphi, ktoré v tomto médiu nerastú.

Hľadanie žánru Salmonella je časté vo vzorkách stolice, vody alebo potravín. V tomto zmysle môže byť toto médium veľmi užitočné. Tento agar vytvoril v roku 1925 Kristensen, Lester a Jurgens, neskôr upravil Kauffmann.

Skladá sa z multiplayónov zo štiepeného zvieracieho tkaniva peptického a digreatického kazeínu, obsahuje tiež kvasinkový extrakt, chlorid sodný, laktózu, sacharózu, fenol červenú, jasne zelenú a priľnavosť.

Vyznačuje sa tým, že je pomerne nehostinným médiom pre väčšinu baktérií, čo uprednostňuje rast Salmonella, avšak niektoré koliformy sú v ňom schopné existovať a slabo sa vyvíjajú.

Je dôležité zdôrazniť, že v tomto médiu žáner Shigella nerastie a ani jeden Salmonella typhimurium, ani Salmonella paratyphi. Preto, ak chcete tieto mikroorganizmy izolovať, mali by sa používať aj iné médiá, napríklad XLD agar.

Základ

Jasne zelený agar

Každá z komponentov, ktoré tvoria médium, plní špecifickú funkciu, ktorá určuje charakteristiky a vlastnosti agaru.

Pluripeptóny a kvasinkový extrakt sú zdrojom živín, kde mikroorganizmy berú dusík a minerály potrebné pre ich vývoj. Laktóza a sacharóza sú zdroje energie pre mikroorganizmy, ktoré sú schopné ich fermentovať.

Jasne zelená je látka inhibítora, ktorá bráni vývoju gramálnych baktérií a veľkého počtu gramálnych negatívnych mikroorganizmov.

Môže vám slúžiť: troponín: charakteristiky, štruktúra, funkcie a testy

Chlorid sodný poskytuje životnému prostrediu osmotickú stabilitu. Zatiaľ čo červený fenol je indikátorom pH, rovnaká farebná vira pri detekcii výroby kyselín z fermentácie uhľohydrátov.

Nefermentárne kolónie laktózy a sacharózy rastú v tomto médiu bielej alebo priehľadnej bielej farby na červenom pozadí. Napríklad baktérie rodu Salmonella.

Zatiaľ čo baktérie fermentujúce laktózu alebo sacharózu schopné pestovať v tomto médiu, vyvíjajú sa žltá alebo žltkastá žltá farba, na zelenkavom žltom pozadí. Napríklad, Escherichia coli a Klebsiella pneumoniae.

Jasne zelené varianty agaru (BGA)

Existujú aj ďalšie varianty jasne zeleného agaru; Jasne zelená girvobiocín apar (NBG) a brilantná chamtivosť rástla glicerol avokín laktóza (NBGL).

Jasne zelená glukóza Novobiocin Agar (NBG)

Obsahuje poľnohospodárstvo sójovej sóje, železitý amónny Citro.

Používa sa na izoláciu kolónií Salmonella od vzoriek stolice.

V tomto prípade jasne zelená a novobiocín sú inhibičné látky, ktoré bránia rastu gramne pozitívnych baktérií a niektorých gramálnych negatívnych mikroorganizmov.

Tiosíran sodný je zdroj síry a železitý citrát je zdroj železa, ktorý je potrebný na odhalenie produkcie sulfidu vodíka tvorbou čiernej zrazeniny sulfidu železitého.

Glukóza je fermentovateľná uhľohydrát a fenol červená je indikátor pH.

V tomto médiu sa kolónie Salmonella vyvíjajú veľké s čiernym centrom obklopeným červenkastým halo a nasleduje jasná viditeľná oblasť. Niektoré kmene Citrobakter freundii produkovať rovnaké kolónie ako kolónie Salmonella.

Môže vám slúžiť: Flora a fauna z Duranga: Reprezentatívne druhy

Brilantný glicerol zelený zelený avobiocín laktóza glycerol (NBGL)

Toto médium obsahuje poľnohospodárstvo sójovej sóje, citrát z železitého amónneho, tiosíran sodný, laktózu, glycerol, jasne zelená, novobiocín a destilovaná voda.

Rozdiel v tomto médiu s predchádzajúcim.

Médium sa tiež používa na izoláciu druhov salmonely, kolónie sa vyvíjajú čierne, výrobou sulfidu vodíka.

Iba kolónie, ktoré neprodukujú kyselinu z glycerolu alebo laktózy, dosahujú H₂Je dostatočný, pretože pH pri interferovaní s tvorbou H₂Siež. To má za následok bezfarebné kolónie pre väčšinu druhov proteus a cytrobacter.

Príprava

-Vážiť 58 gramov dehydratovaného média získaných komerčne. Pridajte ho do litru pohonnej vody. Zmiešajte, nechajte pár minút stáť a odoslať prípravu na zdroj tepla, až kým sa úplne nerozpustí.

-Autoclave pri 121 ° C počas 15 minút, nepresahujte čas sterilizácie.

-Nechajte stáť a slúžiť stále horúce na Petriho sterilných tanieroch. Konečné pH musí byť 6,9 ± 0,2.

-Nechajte upevniť a uložiť do chladničky, až kým sa nepoužijete. Pred zasiatím dosiek musia mať izbovú teplotu.

-Prášok je zelený a pripravený má oranžovo-hnedú alebo červenkasto-zelenkavú farbu v závislosti od pH a komerčného domu. Veľmi hnedá farba naznačuje, že agar bol prehriaty.

-Akonáhle sa agar neodporúča, neodporúča sa znovu vybudovať, pretože médium sa zhoršuje.

Použitie/aplikácie

Toto médium sa používa okrem iného na hľadanie kmeňov kmeňov vzoriek Salmonella s výkaly a mliečnych potravín.

Môže vám slúžiť: fosfatidilserín: štruktúra, syntéza, funkcie, umiestnenie

Ak je pomerne nehostinný. V opačnom prípade by sa malo pred siatom v tomto médiu vykonať vopred obohatenie a obohatenie vzoriek.

Pretože niektoré kmene Salmonella sú inhibované alebo rastú s ťažkosťami, je vhodné sprevádzať toto médium s ďalším selektívnym vekom pre salmonelu.

Každá kolónia s typickou charakteristikou salmonel musí byť podrobená biochemickým testom na definitívnu identifikáciu.

Qa

Na testovanie správneho fungovania jasne zeleného agaru. Kmene ATCC sa môžu použiť na pozorovanie ich vývoja na ňom.

Najčastejšie kmene používané na kontrolu kvality sú: Salmonella Enteritidis ATCC 13076, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Proteus mirabilis ATCC 43071, Klebsiella pneumoniae ATCC 700603, Escherichia coli ATCC 25922,  Shigella Flexneri ATCC 12022, Stafylococcus aureus ATCC 6538.

Prvé 3 musia dať ružové alebo priehľadné biele kolónie na červenom pozadí. Salmonella s dobrým vývojom a proteus s obmedzeným alebo pravidelným rastom.

V prípade Klebsiella a Escherichia sa očakávajú zelenkavé žlté kolónie so žltým pozadím a v prípade Shigella a Staphylococcusu musia byť inhibované.

Dehydratované médium musí byť skladované pri izbovej teplote, na suchom mieste, pretože médium je veľmi hygroskopické.

Odkazy

1. Británske laboratórium. Jasne zelený agar. 
2. BD laboratórium. BD brilantný zelený agar.