Hlava Czapek, príprava, použitia a obmedzenia

On Agar Czapek (CZA) je selektívne tuhé kultivačné médium špeciálne navrhnuté na pestovanie húb baktérií a saprophytov. Vytvoril ho botanik Friedrich Johann Franz Czapek z poľského pôvodu a americký chemik Artur Wayland Dox; Z tohto dôvodu je tento agar známy aj ako polovica Czapek-Dox.

Pôvodné médium bolo tekuté, ale neskôr bol pridaný agar na vykonanie pevného média. Médium Czapek sa skladá z dusičnanu sodného, ​​bipotazického fosfátu, síranu horečnatého, chloridu draselného, ​​železného síranu, sacharózy, agaru a destilovanej vody.

Czapek a. Aspergillus paraziticus b. Aspergillus fumigatus Zdroj: a. Medmyco [CC BY-SA 4.0 (https: // creativeCommons.Org/licencie/By-SA/4.0)]/ b. Foto: Dr. David Midgley. Wikipedia.com

Czapek Agar je 7.3, ale existuje variant, ku ktorému sa pridá 10% kyselina mliečna, ktorej pH je 3,5. Toto kyslé médium sa používa na kultiváciu kyslých mikroorganizmov.

Na druhej strane, niektoré komerčné domy modifikovali zloženie agaru Czapek zmenou síranu horečnatého a bipotazického fosfátu glyceofosfátom; Táto modifikácia zabraňuje zrazeniu fosforečnanu horečnatého pozorovaným konvenčným vzorcom. Podobne existuje ďalší variant, do ktorého sa pridáva extrakt kvasiniek.

Nakoniec, Czapek Agar odporúča APHA American Public Health Association APHA na štúdium Actinomycetes SP, Aspergillus SP, Paecilomyces SP a Penicillium sp. Tieto druhy sa vyznačujú tým, že sú environmentálne mikroorganizmy a oportunistické patogény.

[TOC]

Základ

Toto médium obsahuje sacharózu; Tento uhľohydrát slúži ako zdroj uhlíka, zatiaľ čo dusičnan sodný je zdrojom dusíka, ale na rozdiel od iných prostriedkov je poskytnutý dusík anorganický typ.

Z tohto dôvodu sa médium Czapek považuje za selektívne, pretože môže vyvinúť iba mikroorganizmy schopné používať anorganické zlúčeniny ako jediný zdroj dusíka.

Ako regulačná látka strednej osmolarity je bipotazický fosfát. Na druhej strane síran horečnatý, chlorid draselného a síran železitý poskytujú základné minerály pre rast mikroorganizmov saprofytov (voľný život). S týmto vzorcom sa vytvorí zrazenina fosforečnanu horečnatého.

Môže vám slúžiť: Agar Standard Account: Foundation, príprava a použitia

Nakoniec, agar-adding je zlúčenina, ktorá poskytuje pevnú konzistenciu životnému prostrediu a voda je rozpúšťadlom všetkých komponentov.

S modifikovaným vzorcom agar Czapek nedochádza k tvorbe zrazeniny a zlepšuje rast rastu niektorých húb.

Extrémna kyslosť kyslého agaru Czapek je to selektívnejšie prostriedky, ktoré umožňujú iba rast kyslých mikroorganizmov, ktoré sú schopné používať anorganický dusík. Zatiaľ čo agar Czapek-Levadura zlepšuje výkon určitých húb.

Príprava

Half Czapek-Dox

Vážiť 49 g dehydratovanej kultúry a rozpúšťajte sa v destilovanej vode. Aplikujte teplo na varenie. Zmes sa často potriasť, až kým sa úplne nerozpustí.

-Agar Czapek

Distribuujte zmes rozpustenú v skúmavkách a autoklavate pri 121 ° C počas 15 minút. Po odstránení z autoklávu sa homogenizujte pred spaním a nechajte stuhnúť.

-Taniere agar Czapek

Autoklavate zmes rozpustená pri 121 ° C počas 15 minút a keď necháte vychladnúť pri 50 ° C, homogenizácia a nalievanie 20 ml do sterilnej Petriho Petriho. Nechajte upevniť, investovať a ušetriť do chladničky, až kým sa nepoužívate.

PH musí byť 7,3 ± 0,2. Farba dehydratovaného média je biela a pripravená je ľahká jantárová, mierne zamračená v dôsledku prítomnosti flokulačnej zrazeniny.

Polovica Czapek A PH PH

Pripravte sa podľa opísaného, ​​ale pridanie 10 ml sterilnej sterilnej kyseliny do 10% pre každý liter pripraveného média. Modifikované médium Czapek musí byť pri pH 3,5 ± 0,2.

Napoly modifikovaný czapek

Vážiť 45,4 g dehydratovaného média a rozpustite sa v 1 litri vody. Zvyšok prípravy sa rovná prípravu opísanej vyššie. Farba dehydratovaného média je biela a pripravená je belavá farba. Konečné pH média je 6,8 ± 0,2.

Môže vám slúžiť: vimentín: Charakteristiky, štruktúra, funkcie a použitia

Half Czapek-Levadura

Nazýva sa tiež czapek-extrakcia kvasiniek (CyA). Obsahuje prvky klasického extraktu z agaru Czapek Plus plus kvasinky.

Využitie

Médium Czapek sa používa na hľadanie mikroorganizmov saprofytov vo vzorkách pôdy, zeleniny, zrná, vzduchu, hmyzu.

Czapek kyslý agar sa používa na rast acidofilných mikroorganizmov, zatiaľ čo modifikovaný agar Czapek je obzvlášť užitočný na tvorbu camidosporu v zložitých druhoch Candida albicans.

Nakoniec je agar Czapek -leVadura veľmi užitočný pre izoláciu Aspergillus a Penicillium.

Vysiať

-Agar Czapek

Ak chcete hľadať aktinomycety na zemi, postupujte takto: Vzorka s vodou fenolizovanou do 30 minút sa ošetrí a potom sa vysadí 1 ml suspenzie v agar Czapek. Inkubuje pri 28 ° C počas 5 až 7 dní.

Pre vzorky zeleniny, obilia a hmyzu sú umiestnené priamo na agar. Riedenia sa môžu vykonať aj a zasiať 0,1 ml na povrchu agaru.

-Upravený agar

Na zasiatie sa používa rovná ruka alebo ihla, je preniknutá tampónom a naočkuje odmerku, ktorá vytvára defekt, až kým sa nedotýka spodnej časti dosky. Inkubujte 24 hodín pri 28 ° C a preskúmajte mikroskopom nad a pod doskou, aby ste pozorovali, či sa vzrástli camidospory.

Inkubačná teplota a čas

Čas teploty a inkubácie sa líši v závislosti od typu mikroorganizmu, ktorý sa snaží izolovať. Zvyčajne sa dosky inkubujú o jeden až dva týždne v teplotnom rozsahu 20 až 25 ° C.

Pre niektoré kmene však existujú špecifické podmienky. Napríklad väčšina druhov rodu Aspergillus má optimálny rast pri 30 ° C; však Do. fumigatus Rast pri 50 ° C.

Pokiaľ však ide o čas inkubácie, jeden alebo dva týždne je normálne Candida albicans Môže sa vyvinúť za 24 až 48 hodín pri 25 ° C.

Môže vám slúžiť: lipogenéza: charakteristiky, funkcie a reakcie

Charakteristiky niektorých kolónií v tomto médiu

-Atravenetum penicillium

Uskutočňuje sa za 12 dní inkubácie pri 27 ° C. Jeho kolónie sú malé (25 mm).

Kolónie vyzerajú velistky, s bielym definovaným okrajom a v strede predstavuje zelenkavý modrý tón, ktorý súhlasí. Opak kolónie je oranžová, vkladá sa do stredu rovnakej farby výrobou pigmentu.

-Aspergillus Niger

Vyvíja sa s bielym až žltým myceliom a čiernymi spórmi.

-Candida albicans

Krémové béžové svetlo kolónie sa vyvíjajú jasné. Vo forme modifikovanej formy Czapek Agar.

-Aspergillus paraziticus

Tmavo zelené mycélium sa vyvíja za 7 dní pri 25 ° C.

Qa

Na vyhodnotenie kvality kultivačného média je možné vysielať certifikované kontrolné kmene, napríklad: Aspergillus Niger MKTA 16404, Candida albicans MKTA 10231.

Aspergillus Niger vyvíja biele až žlté mycélium a čierne spóry za približne 5 dní, zatiaľ čo Candida albicans Bude mať uspokojivý rast za 24 hodín inkubácie pri 25 ° C; Kolónie sú krémová farba.

Obmedzenia

Niektoré štúdie odhalili, že na regeneráciu aktinomycetov je agar s najlepším výkonom agar pápež dextrózy, ktorý ponecháva agar Czapek na druhom mieste, ale na zotavenie Aspergillus a penicillium je agar Czapek agar, ktorý poskytuje najväčšie zotavenie miera.

Odkazy

1. Dávila M, a kol. Antagonistické aktinomycety proti fytopatogénnym húb poľnohospodárskeho významu. Otáčať sa. Mex. veda. poľnohospodárstvo 2013, 4 (8): 1187-1196. K dispozícii na: SCIELO.orgán.
2. Luna M, Lozada a pšenica. Izolácia kmeňov Aspergillus Niger, Producenti ocratoxínu A v Café Verde (Arabica Coffea) uložené. Otáčať sa. Mex. Mikrofón . 2010; 32: 63-68. Dostupné v.Scilo.orgán.
3. Prispievatelia Wikipedia. Czapek Medum. Wikipedia, bezplatná encyklopédia. 13. januára 2019, 20:30 UTC. K dispozícii na: v.Wikipedia.orgán
4. Laboratóriá Conda pronadisa. Modifikovaný agar Czapek-Dox. K dispozícii na: Condalab.com
5. Kultivačné médiá mikrokitu. Agar Czapek-Dox. Godponible In: Medium Cultutive.com