Baird Parker Agar Čo je, nadácia, príprava, použitie

On Agar Baird Parker Alebo agar vaječného žĺtka je pevné, selektívne a diferenciálne kultivačné médium. Bol vytvorený v roku 1962 na detekciu a počet pozitívnych koagulázových stafylokokov (Stafylococcus aureus).

Skladá sa z hydrolyzovaného pankreatického kazeínu, extraktu z mäsa, kvasinkového extraktu, chloridu lítium, glycínu, pyruvátu sodného, ​​teluritu draselného, ​​rukoväte a emulzie žĺtka vajíčka.

Typické kolónie Staphylococcus aureus v Baird Parker Staring. Zdroj: Daizy John [CC po 4.0 (https: // creativeCommons.Org/licencie/o/4.0)]

Baird Parker Agar je založený na kapacite Siež. aureus na zníženie telurita a produkciu lecistinázy. Obe vlastnosti generujú kolóniu so špecifickými charakteristikami tohto druhu. Preto poskytuje veľkú účinnosť pri detekcii tohto mikroorganizmu.

Typické kolónie Siež. aureus Sú čierne alebo tmavo šedé, s bezfarebným okrajom a čírym halo, ktoré ich obklopuje, odlišujúce od zvyšku mikroorganizmov. Tento patogén sa nachádza v klinických vzorkách, vodách, kozmetike a surových alebo varených potravinách.

Jeho diagnostika alebo detekcia je nanajvýš dôležitá v dôsledku rozmanitosti patológií, ktoré vyvoláva, ako je otravu potravín, syndróm obaraného kože, syndróm toxického šoku, abscesy, meningitída, septikémia, endokarditída,.

Základ

Výživa

Hydrolyzovaný kazeín pankreasu, extrakt z mäsa a kvasinkový extrakt sú zdroje živín, vitamínov a minerálov potrebné na mikrobiálny všeobecný vývoj, zatiaľ čo pyruvát a glycín sú zlúčeniny, ktoré uprednostňujú špecifický rast Stafylococcus aureus.

Selektívny

Baird Parker Agar je selektívny, pretože obsahuje látky, ktoré inhibujú rast sprievodnej flóry, pričom uprednostňuje vývoj Siež. aureus. Inhibičné zlúčeniny sú chlorid lítium a telurit draslíka.

Diferenciálny

Toto médium umožňuje rozlíšenie Siež. aureus zvyšku negatívnej koagulázovej stafylokoky. Siež. aureus Má schopnosť redukovať telurit na čierny kovový teluro, vytvára čierne alebo tmavošedé kolónie.

Podobne aj vaječný žĺtok poskytuje substráty na preukázanie prítomnosti enzýmu lektázy a lipasa. Siež. aureus Je to pozitívna lecistináza, a preto bude okolo kolónie pozorovaný jasný halo, čo naznačuje, že lecitín bol hydrolyzovaný.

Môže vám slúžiť: žiabrové dýchanie: Ako sa to robí a príklady

V tomto zmysle vzhľad v tejto čiernej alebo jasne čiernej alebo šedej hrebeňovej hrubom čreve Siež. aureus. 

Ak sa vytvorí zrážacia zóna, naznačuje sa, že existuje aktivita lipázy. Niektoré kmene Siež. aureus Sú pozitívne a iné negatívne lipázy.

V prípade, že Siež. aureus Byť pozitívnou lipázou, nepriehľadná oblasť bude pozorovaná okolo čiernej alebo tmavo šedej kolónie a potom je jasný halo na pôsobenie lecistinázy.

Kolónie baktérií iné ako Siež. aureus schopní rásť v tomto médiu, vyvinú bezfarebné alebo hnedé kolónie, bez toho, aby sa okolo halo.

Môžete tiež pozorovať atypické čierne kolónie s bezfarebným okrajom alebo bez nej, ale bez svetla halo. Tieto kolónie by sa nemali brať do úvahy, nezodpovedajú Siež. aureus.

Príprava

Emulzia vajec

Užíva sa chladné kuracie vajce, dobre sa putuje a umiestnil 2 až 3 hodiny v 70% alkoholu. Potom sa vajce otvára asepticky a opatrne oddeľuje svetlo žĺtka. Následne sa odoberie 50 ml žĺtku a zmieša sa s 50 ml sterilného fyziologického roztoku.

1% p/v draslík Tellto

Niektoré komerčné domy predávajú 1% básnickú teluro pripravené na použitie. Pridá sa do média skôr, ako prostriedky stuhnú.

Na prípravu tohto riešenia v laboratóriu, 1.0 gr z draslíka Tellurite a rozpúšťa sa v časti vody. Následne sa množstvo vody dokončí, až kým nedosiahne 100 ml. Roztok musí byť sterilizovaný metódou filtrácie.

Príprava kultivačného média

Vážiť 60 g gr dehydratovaného média a rozpúšťajte sa v 940 ml destilovanej vody. Nechajte pokojovú zmes približne 10 až 10 minút.

Môže vám slúžiť: Interšpecifické vzťahy: typy a príklady

Na zlepšenie procesu rozpustenia často naneste miešanie tepla, na zlepšenie procesu rozpustenia. Nechajte chvíľu uvariť. Sterilice v autokláve pri 121 ° C počas 15 minút.

Nechajte stáť, kým nedosiahne teplotu 45 ° C a pridajte 50 ml emulzie vajíčkového žĺtka a 10 ml 1% teluritu. Dobre premiešajte a podávajte medzi 15 až 20 ml na petri sterilných platne.

Nechajte stuhnúť, objednávať v obrátených doštičkách a ušetrite v chladničke až do použitia.

Konečné pH pripraveného média musí byť 6,8 ± 0,2.

Pred zasiatím vzorky by ste mali počkať, kým tanier vezme teplotu životného prostredia. Plaky sejú v dôsledku strieľajúceho alebo povrchu vysadeného pomocou drigalski špachtle.

Farba dehydratovaného média je pražená a farba pripraveného média je ľahká jantárová.

Využitie

Klinické vzorky

Klinické vzorky sa priamo zasiajú prepustením časti materiálu na jednom konci taniera a odtiaľ vychádzajú z dôvodu vyčerpania. Inkubujte 24 až 48 hodín pri 35-37 ° C.

Vzorky jedla

Zvážte 10 GR vzorky potravín a homogenizáciu v 90 ml 0,1%vody Peptonada, odtiaľ pripravujú riedenia, ak je to potrebné. Naočkujte plaky trojmo s 0,3 ml pripravených roztokov a siak povrchom s drigalski špachtľou. Je to inkuba 24 až 48 hodín pri 35-37 ° C.

Táto metodika vám umožňuje spočítať typické získané kolónie a je ideálna, keď prítomnosť Siež. aureus nad 10 UFC na gr/ml vzorku.

Ak existuje podozrenie, že suma Siež. aureus Je malý alebo je tu veľa sprievodnej flóry, navrhuje sa. To bude uprednostňovať rast Siež. aureus a inhibujte vývoj sprievodnej flóry. Tubes chumáčikov sa vysiava v Baird Parker Agar.

Môže vám slúžiť: Ako sú živé organizmy z nášho prostredia, ktoré sa vyznačujú?

Vzorky vody

Vo vákuovom a sterilizovanom filtračnom systéme sa prefiltruje 100 ml študovanej vody a potom sa mikroporézna membrána 0,4 mikrónov odstráni sterilnou svorkou a umiestni sa na baird parkerovú dosku. Je to inkuba 24 až 48 hodín pri 35-37 ° C. Táto technika umožňuje počítať typické kolónie Siež. aureus.

Qa

Na vyhodnotenie kvality Baird Parker Agar sa môžu použiť známe kmene, napríklad ako napríklad Stafylococcus aureus ATCC 25923, Stafylococcus aureus ATCC 6538, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Escherichia coli ATCC 25922 o Proteus mirabilis ATCC 43071.

V prípade kmeňov Siež. aureus Je známe, že ATCC znižuje telurit a sú to pozitívna lipáza a lecistináza. Preto musí existovať uspokojivý vývoj a rastú konvexné kolónie s čiernym stredom a bezfarebným okrajom, s nepriehľadným halo a ďalším externejším halo čistým.

Po jeho časti, Siež. epidermidis V tomto médiu sa očakáva zlý vývoj, so šedými kolóniami kotvujúcimi na čiernu farbu, bez jasného halo.

Pre A. coli a P. Mirabilis Očakáva sa, že bude úplne alebo čiastočne inhibovaná. V prípade pestovania hnedých kolónií bez nepriehľadnej zóny alebo čistého halo.

odporúčania

-Médium by sa nemalo zahrievať po pridaní telurito a vaječného žĺtka.

-Príprava emulzie vajíčkového žĺtka a jej agregátu v strede je veľmi zraniteľným krokom kontaminácie. Musí sa venovať starostlivosť.

-Ak existuje prítomnosť typických kolónií Siež. aureus Musí sa potvrdiť jazdou na koagulázovom teste na uvedené napätie.

-Ak sú s koagulázou pochybné výsledky, musia sa namontovať ďalšie potvrdzovacie testy.

-Dávajte pozor, aby ste si nezamieňali prítomnosť typických kolónií Siež. aureus S atypickými čiernymi kolóniami.

Odkazy

1. BD Laboratories. Agar Baird Parker. K dispozícii na: BD.com
2. Laboratóriá Francisco Soria Melguizo. Agar Baird Parker. K dispozícii na: http: // f-soria.Je/informovať